检测项目

1.病原菌分离培养：采用PDA培养基（pH5.6-6.2），251℃暗培养7-14天

2.菌丝形态观察：测量菌丝直径（3.5-5.2μm）、隔膜间距（45-120μm）及分枝角度（60-90）

3.分生孢子检测：统计孢子密度（≥10^4CFU/g），测量孢子尺寸（12-184-6μm）

4.致病力测定：接种后观察病斑扩展速率（≥2.3mm/d），统计发病率（≥85%）

5.土壤带菌量分析：qPCR定量检测靶标基因（EF1-α）拷贝数（≥10^3copies/g）

检测范围

1.柿树根系样本（直径≤5mm的细根）

2.发病叶片样本（黄化或萎蔫症状区域）

3.根际土壤样本（深度20-40cm土层）

4.嫁接材料样本（砧木切口部位）

5.果实样本（早期褐变组织）

检测方法

1.ISO21427:2018《植物病原真菌分离培养技术规范》

2.GB/T3543.5-1995《农作物种子检验规程真菌病害检验》

3.ASTMD7990-15《植物病原体分子检测标准指南》

4.GB/T36852-2018《林木病害分子检测技术规程》

5.ISO16198:2015《土壤质量-植物病原微生物的定量检测》

检测设备

1.OlympusBX53显微镜：配备DP27相机（分辨率20481536），用于菌丝形态观测

2.Bio-RadT100PCR仪：支持梯度PCR（温度精度0.1℃），用于靶标基因扩增

3.ThermoScientificHeratherm培养箱：温度均匀性0.5℃，用于病原菌培养

4.Eppendorf5424R离心机：最大转速15,300rpm，用于DNA提取纯化

5.SartoriusQuintix224-1CN分析天平：精度0.1mg，用于培养基配制

6.MiltenyiBiotecGentleMACS组织破碎仪：程序化裂解植物样本

7.QiagenRotor-GeneQ实时荧光定量PCR仪：支持多通道荧光检测

8.MemmertIPP110培养箱：CO₂浓度控制精度0.1%，用于特殊培养条件

9.LeicaCM1950冷冻切片机：切片厚度精度1μm，用于组织病理学观察

10.ThermoNanoDropOne超微量分光光度计：测量DNA浓度（灵敏度2ng/μL）