检测项目

1.RNA完整性检测：通过RIN值（RNAIntegrityNumber）评估样本质量，测量范围1-10

2.核酸浓度测定：采用紫外分光光度法测定A260/A280比值（标准范围1.8-2.1）

3.转录物定量分析：qRT-PCR法测定Ct值（循环阈值），灵敏度达0.1pg/μL

4.外源性污染检测：DNase/RNase残留量测定（阈值≤0.05EU/mL）

5.多聚腺苷酸化水平：Poly(A)尾长度测定（分辨率5nt）

6.选择性剪接分析：电泳迁移率测定（分辨率100-5000bp）

检测范围

1.哺乳动物细胞培养物（HEK293、HeLa等）

2.全血/血清/血浆样本（抗凝剂类型包括EDTA、肝素）

3.植物组织样本（叶片/根茎/种子）

4.微生物样本（细菌/真菌总RNA）

5.FFPE病理切片（保存时间≤10年）

6.环境样本（土壤/水体微生物群落RNA）

检测方法

ISO20395:2018《生物技术-RNA完整性评估方法》

ASTME3134-18《核酸定量标准指南》

GB/T34796-2017《核酸浓度测定通则》

YY/T1256-2023《体外诊断试剂用核酸纯化试剂盒》

ISO17861:2020《实时荧光定量PCR技术要求》

GB/T37873-2019《生物样品中RNA病毒检测方法》

检测设备

ThermoFisherQubit4.0荧光计：高灵敏度核酸定量（0.1-1000ng）

Agilent2100Bioanalyzer：RNA完整性及片段分析（RIN值测定）

NanoDropOneC紫外分光光度计：微量样本纯度测定（1μL样本量）

Bio-RadCFX96实时PCR系统：qRT-PCR扩增效率分析（六通道荧光检测）

IlluminaNovaSeq6000测序仪：高通量转录组测序（单次运行20亿reads）

BeckmanCoulterBiomeki7自动化工作站：标准化核酸提取流程（通量96样本/批次）

SageSciencePippinPrep电泳系统：精确核酸片段分选（精度5bp）

EppendorfMastercyclerX50PCR仪：梯度温度控制（温控精度0.1℃）

MiltenyiBiotecGentleMACS组织处理器：硬质样本均质化处理（转速3000rpm）

CovarisS220超声破碎仪：可控片段化处理（峰值功率50-200W）