检测项目
1.形态特征检测:体长(6.5-8.2mm)、鞘翅斑纹数量(102个)、前胸背板刻点密度(≥15个/mm)
2.分子生物学检测:线粒体COI基因序列(658bp)、ITS2核基因片段(450-500bp)
3.发育阶段判定:卵期(7-9天)、幼虫体节数(13节)、蛹重(0.12-0.15g)
4.寄主适应性测试:取食量测定(日均0.8-1.2cm叶片)、产卵量统计(单雌30-50粒)
5.抗药性监测:LD50值测定(拟除虫菊酯类≤0.02μg/头)、代谢酶活性(GSTs≥25nmol/min/mg)
检测范围
1.新鲜果蔬类:柑橘属果实、十字花科蔬菜等农产品表面附着虫体
2.木材及制品:松木、杉木等原木及加工板材内部蛀道残留物
3.植物检疫样本:进出口苗木根系携带的卵块或幼虫
4.仓储包装材料:木质托盘、柳条箱缝隙中的越冬成虫
5.土壤环境样本:耕作层0-20cm深度范围内的蛹室结构
检测方法
1.ISO21571:2005分子生物学检测规范(DNA提取与PCR扩增)
2.GB/T35337-2017昆虫形态学鉴定技术规程(体视显微镜观测法)
3.ASTME1752-17昆虫抗药性生物测定标准方法(点滴法/浸渍法)
4.SN/T2038-2007进境植物检疫中潜叶性害虫检测规程
5.NY/T3089-2017农作物害虫田间种群监测技术规范
检测设备
1.LeicaM205C体视显微镜:400倍放大观测口器结构及鞘翅刻点
2.HitachiSU3500扫描电镜:纳米级分辨率分析跗节微形态特征
3.Bio-RadT100PCR仪:梯度温控进行COI基因扩增
4.Agilent4200TapeStation系统:DNA/RNA完整性数值化评估(RIN≥7.0)
5.SartoriusCP225D电子天平:0.01mg精度称量虫体生物量
6.ThermoScientificMultiskanSky全波长酶标仪:测定解毒酶活性OD值
7.OlympusBX53荧光显微镜:DAPI染色观察卵黄蛋白沉积模式
8.EppendorfCentrifuge5430R高速离心机:12000rpm分离DNA提取液
9.MemmertIPP110培养箱:251℃恒温条件下完成世代发育观察
10.GIS-basedArcMap10.8系统:空间分析虫害扩散热点区域