检测项目
1.DNA纯度测定:A260/A280比值(1.8-2.0为合格范围),A260/A230比值(>2.0)
2.GC含量分析:双链DNA中鸟嘌呤-胞嘧啶占比(20%-80%可测范围)
3.AT/GC比例测定:腺嘌呤-胸腺嘧啶与鸟嘌呤-胞嘧啶摩尔比(0.05误差限)
4.RNA完整性检测:28S/18SrRNA比值(≥1.5为完整样本)
5.核酸浓度定量:双链DNA线性范围0.2-50μg/mL(A260法)
检测范围
1.DNA提取物:包括质粒DNA、基因组DNA、PCR产物等
2.RNA样本:总RNA、mRNA及各类小RNA分子
3.合成寡核苷酸:引物、探针及适配体(15-100nt长度范围)
4.病毒核酸:包膜病毒与非包膜病毒基因组
5.修饰核酸:甲基化DNA、硫代磷酸化RNA等衍生物
检测方法
1.紫外分光光度法:依据GB/T34799-2017《核酸浓度与纯度测定》
2.荧光定量法:采用SYBRGreenI染料(ISO20391-1:2018标准)
3.毛细管电泳法:执行ASTME2403-06(2021)规范
4.高效液相色谱法:参照GB/T37873-2019《生物制品中核酸类物质检测》
5.实时定量PCR法:符合YY/T1824-2021行业标准要求
检测设备
1.ThermoScientificNanoDrop2000:微量核酸浓度测定(1μL样本量)
2.Agilent2100Bioanalyzer:电泳法分析DNA/RNA完整性(灵敏度0.5ng/μL)
3.BeckmanCoulterDU800UV-Vis:全波长扫描(190-840nm范围)
4.Qubit4.0Fluorometer:高精度荧光定量(dsDNAHSassay0.2-100ng)
5.ShimadzuLC-20ATHPLC:反相色谱柱分离核酸组分(C18柱)
6.Bio-RadCFX96RT-qPCR:熔解曲线分析GC含量(温度分辨率0.1℃)
7.EppendorfBioSpectrometerbasic:符合GLP规范的比色皿检测系统
8.PerkinElmerLambda365:配备Peltier温控的紫外分光系统
9.FragmentAnalyzer5200:自动毛细管电泳(DNASizeRange25-50,000bp)
10.MalvernZetasizerUltra:动态光散射法测定核酸聚集状态