检测项目
1.形态学特征:伞径(测量精度0.1mm)、触手数量(≥20条/个体)、口腕长度比(伞径:口腕=1:1.2-1.8)
2.刺细胞密度:触手单位面积刺胞数(≥500个/mm),采用0.01%甲苯胺蓝染色法测定
3.毒素含量:河豚毒素(TTX)定量(检出限0.1μg/g)、刺胞毒素蛋白浓度(ELISA法≥5ng/mL)
4.遗传物质鉴定:线粒体COI基因序列比对(相似度≥99%),18SrRNA特异性引物扩增
5.环境耐受性:盐度适应范围(25-35‰)、温度存活阈值(8-30℃梯度实验)
检测范围
1.活体样本:实验室培养个体(伞径3-15mm)、野外采集成熟体
2.组织样本:冻干触手组织(-80℃保存)、福尔马林固定伞部标本
3.水体残留物:刺细胞脱落物(0.22μm滤膜富集)、胞外黏液分泌物
4.食品污染物:水产加工品中混杂水母碎片(目视检出限1mm)
5.生态样本:浮游生物网采集物(200μm网目分级)
检测方法
1.ASTMD7066-07《浮游生物中刺胞动物毒素测定》
2.ISO21427-2:2006《水质-遗传毒性测定-第2部分:混合种群分析法》
3.GB/T28024-2011《水产品中河豚毒素的测定液相色谱-串联质谱法》
4.GB17378.4-2007《海洋监测规范第4部分:海水分析》浮游生物章节
5.AOACOfficialMethod2012.25《海洋生物毒素的液相色谱-质谱联用检测》
检测设备
1.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪(COI基因扩增)
2.Agilent1260InfinityII高效液相色谱系统(TTX分离精度0.01μg/mL)
3.LeicaDM500生物显微镜(400相衬观察刺细胞形态)
4.MettlerToledoXSR205电子天平(0.01mg级生物量称重)
5.MiltenyiBiotecGentleMACS组织破碎仪(保持刺细胞完整性)
6.EppendorfCryoCubeF240超低温冰箱(-86℃样本保存)
7.OlympusSZX16体视显微镜(三维测量伞径误差≤2%)
8.BeckmanCoulterCytoFLEX流式细胞仪(刺细胞计数通量>1000个/秒)
9.SartoriusVivaspin20超滤离心装置(10kDa分子截留浓缩毒素)
10.HachHQ440d多参数水质分析仪(现场盐度测定精度0.1‰)