检测项目

1.探针灵敏度验证：检测下限≤10copies/μL，动态范围10^1-10^7copies/μL
2.特异性交叉反应测试：非靶标RNA干扰率≤5%
3.杂交稳定性评估：37℃条件下72小时信号衰减率≤15%
4.荧光标记效率测定：FAM标记探针量子产率≥0.85
5.热力学参数分析：Tm值偏差≤1.5℃（理论值vs实测值）

检测范围

1.临床样本：血清/血浆游离RNA、组织切片原位RNA
2.环境样本：水体/土壤微生物总RNA提取物
3.食品基质：转基因作物外源RNA残留物
4.法医检材：微量RNA降解样本（RIN≥4.0）
5.科研材料：细胞培养物mRNA富集产物

检测方法

ISO20186-1:2016分子体外诊断检验-预检过程规范
GB/T34796-2017核酸探针纯度检测紫外分光光度法
ASTME2148-16核酸杂交试验标准指南
YY/T1256-2020体外诊断试剂用核酸探针通用技术要求
ISO20395:2019生物技术-核酸靶序列定量方法要求

检测设备

1.QuantStudio7Pro实时荧光定量PCR仪：支持TaqMan探针熔解曲线分析
2.NanoDropOneC微量分光光度计：1μL样本纯度检测（A260/A280比值）
3.Bio-RadChemiDocMP成像系统：化学发光法信号采集（CCD分辨率20482048）
4.Agilent4200TapeStation系统：RNA完整性数值（RIN）测定
5.ThermoFisherMaxQ6000恒温摇床：杂交反应温控精度0.2℃
6.EppendorfMastercyclerX50梯度PCR仪：探针标记扩增程序控制
7.BeckmanCoulterCytoFLEX流式细胞仪：微球悬浮芯片信号读取
8.OlympusBX53荧光显微镜：原位杂交结果显微观察（400物镜）
9.MalvernZetasizerNanoZSP：动态光散射法探针粒径分析
10.RocheLightCycler480II：多重探针交叉验证（6色通道）