检测项目
1.酶活性测定:催化ATP生成cAMP的速率(单位:U/mg),反应体系含10mMATP、5mMMgCl₂
2.比活性分析:单位蛋白质量下的催化效率(U/mg),采用Lowry法测定蛋白浓度
3.温度稳定性测试:30-70℃梯度温育后残余活性(保留率≥80%为合格)
4.pH耐受性评估:pH5.0-9.0缓冲体系中活性变化曲线
5.抑制剂敏感性:Forskolin(10μM)及SQ22536(100μM)作用下的活性抑制率
检测范围
1.重组腺苷酸环化酶制剂(原核/真核表达系统)
2.细胞膜蛋白提取物(哺乳动物细胞/昆虫细胞)
3.临床诊断试剂盒核心组分
4.食品工业用酶添加剂(GB2760标准适用产品)
5.药物研发中靶向调控剂筛选样本
检测方法
1.ISO21571:2013《生物技术-酶活性测定通用指南》
2.ASTME2520-18《分光光度法测定核苷酸环化酶活性》
3.GB/T34799-2017《酶制剂活力测定通用方法》
4.GB5009.257-2016《食品中环核苷酸的测定》
5.HPLC法(USP<1112>色谱系统适应性要求)
检测设备
1.ThermoScientificMultiskanSkyHigh分光光度计(酶标板模式,波长340nm)
2.Agilent1260InfinityIIHPLC系统(C18色谱柱,UV检测器)
3.EppendorfMastercyclerX50梯度PCR仪(温度精度0.1℃)
4.BeckmanCoulterOptimaXPN-80超速离心机(最大转速80,000rpm)
5.MalvernZetasizerNanoZS动态光散射仪(粒径分析范围0.3nm-10μm)
6.WatersACQUITYUPLCH-Class系统(超高效液相色谱)
7.PerkinElmerEnSpire多模式读板器(荧光/化学发光检测)
8.MettlerToledoSevenExcellencepH计(精度0.001pH)
9.SartoriusCubisII微量天平(称量精度0.001mg)
10.BinderED系列恒温培养箱(温度均匀性0.3℃)