检测项目

1.线粒体DNA缺失分析：mtDNA缺失区域定位（≥4977bp缺失率定量），采用长片段PCR扩增技术

2.肌肉活检病理学：改良Gomori三色染色观察破碎红纤维（RRF≥3%为阳性），COX/SDH双酶活性测定

3.血清代谢物检测：静息乳酸水平（≥2.1mmol/L），运动后乳酸/丙酮酸比值（≥25:1）

4.脑脊液蛋白定量：CSF总蛋白浓度（≥100mg/dL），寡克隆区带电泳分析

5.心脏传导评估：24小时动态心电图（PR间期＞200ms），超声心动图射血分数测定（EF≤50%）

检测范围

1.骨骼肌活检组织样本（冷冻切片厚度8-10μm）

2.外周血单核细胞分离样本（EDTA抗凝管采集）

3.脑脊液样本（腰椎穿刺采集量≥5mL）

4.尿有机酸代谢产物（晨尿样本-80℃保存）

5.心肌组织石蜡包埋样本（病理切片厚度4μm）

检测方法

1.ISO15189:2012《医学实验室质量和能力要求》第7.3条款分子诊断流程控制

2.GB/T30989-2014《线粒体DNA缺失检测技术规范》Southernblot杂交法

3.ASTME3066-16《肌肉组织病理学染色标准化操作规程》

4.CLSIEP07-A3《临床实验室定量测量程序干扰测试》代谢物分析

5.ENISO21571:2005《食品链微生物学-核酸提取纯化》改良版用于mtDNA提取

检测设备

1.ThermoFisherQuantStudio12KFlex实时荧光定量PCR系统（mtDNA拷贝数测定）

2.LeicaCM1950恒冷切片机（-25℃低温肌肉组织切片）

3.Agilent2100Bioanalyzer生物分析仪（DNA完整性指数DIN值测定）

4.RocheCobasc501全自动生化分析仪（乳酸脱氢酶同工酶分离）

5.NikonEclipseNi-U正置荧光显微镜（COX/SDH双染色成像分析）

6.IlluminaNovaSeq6000测序平台（mtDNA全基因组重测序）

7.SiemensADVIACentaurXP化学发光仪（脑脊液蛋白定量检测）

8.GEMAC5000心电图分析系统（PR间期自动测量）

9.BeckmanCoulterCytoFLEX流式细胞仪（线粒体膜电位JC-1探针检测）

10.OlympusBX53病理成像系统（破碎红纤维计数分析）