酵母双杂交测试

检测项目

1. 蛋白质相互作用验证(报告基因β-半乳糖苷酶活性)

2. 文库筛选阳性克隆鉴定(His3/Ura3营养缺陷标记)

3. 相互作用强度定量(β-半乳糖苷酶活性单位U/mL)

4. 互作特异性验证(3-AT浓度梯度0~100 mmol/L)

5. 阳性率检测(文库筛选阳性克隆比例>0.01%)

检测范围

1. 信号通路蛋白互作：激酶-底物互作、泛素化通路

2. 转录因子互作网络：转录因子-辅激活因子

3. 受体-配体互作：膜受体与信号分子

4. 病毒-宿主互作：病毒蛋白与宿主靶蛋白

5. 药物靶标验证：小分子药物靶蛋白筛选

检测方法

1. GB/T 40174-2021 蛋白质相互作用分析技术规范

2. ISO 20395:2019 生物技术 基因扩增检测方法性能评价要求

3. CLSI MM03-A2 核酸杂交试验方法指南

4. GB/T 37861-2019 纳米技术 纳米材料蛋白质吸附测试方法

5. Fields S, Song O. Nature. 1989 酵母双杂交系统原始方法文献

检测设备

1. 酵母双杂交系统(Clontech Matchmaker Gold)：含AH109/Y2HGold菌株，4重报告基因

2. 荧光显微镜(Olympus IX73)：荧光通道DAPI/FITC/TRITC，物镜40×~100×

3. 酶标仪(BioTek Synergy H1)：吸光度/荧光/化学发光，波长200~999 nm

4. 恒温培养箱(Thermo Heratherm IGP60)：温度范围RT~75℃，精度±0.1℃

5. 摇床(New Brunswick Innova 42R)：转速50~400 rpm，温控4~60℃

6. 高压灭菌锅(Sanyo MLS-3780)：灭菌温度121℃，容积50 L

7. 超净工作台(苏州安泰 SW-CJ-1FD)：洁净度ISO 5级，风速0.36~0.54 m/s

8. 显微光度计(Olympus BX53)：测量范围0~200 OD，分辨率0.001 OD

以上是与"酵母双杂交测试"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检检测技术研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。