酵母双杂交测试

酵母双杂交测试利用酵母细胞中转录因子DNA结合域与激活域分别与诱饵蛋白和猎物蛋白融合,通过报告基因表达检测蛋白质间相互作用,广泛应用于信号通路蛋白筛选、新互作蛋白发现及药物靶标验证等研究。

原创阅读 02026-05-09工程师CMACNASISO高新技术企业

检测项目

1. 蛋白质相互作用验证(报告基因β-半乳糖苷酶活性)

2. 文库筛选阳性克隆鉴定(His3/Ura3营养缺陷标记)

3. 相互作用强度定量(β-半乳糖苷酶活性单位U/mL)

4. 互作特异性验证(3-AT浓度梯度0~100 mmol/L)

5. 阳性率检测(文库筛选阳性克隆比例>0.01%)

检测范围

1. 信号通路蛋白互作:激酶-底物互作、泛素化通路

2. 转录因子互作网络:转录因子-辅激活因子

3. 受体-配体互作:膜受体与信号分子

4. 病毒-宿主互作:病毒蛋白与宿主靶蛋白

5. 药物靶标验证:小分子药物靶蛋白筛选

检测方法

1. GB/T 40174-2021 蛋白质相互作用分析技术规范

2. ISO 20395:2019 生物技术 基因扩增检测方法性能评价要求

3. CLSI MM03-A2 核酸杂交试验方法指南

4. GB/T 37861-2019 纳米技术 纳米材料蛋白质吸附测试方法

5. Fields S, Song O. Nature. 1989 酵母双杂交系统原始方法文献

检测设备

1. 酵母双杂交系统(Clontech Matchmaker Gold):含AH109/Y2HGold菌株,4重报告基因

2. 荧光显微镜(Olympus IX73):荧光通道DAPI/FITC/TRITC,物镜40×~100×

3. 酶标仪(BioTek Synergy H1):吸光度/荧光/化学发光,波长200~999 nm

4. 恒温培养箱(Thermo Heratherm IGP60):温度范围RT~75℃,精度±0.1℃

5. 摇床(New Brunswick Innova 42R):转速50~400 rpm,温控4~60℃

6. 高压灭菌锅(Sanyo MLS-3780):灭菌温度121℃,容积50 L

7. 超净工作台(苏州安泰 SW-CJ-1FD):洁净度ISO 5级,风速0.36~0.54 m/s

8. 显微光度计(Olympus BX53):测量范围0~200 OD,分辨率0.001 OD

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

  • 报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
  • 检测周期:7~15工作日,可加急。
  • 资质:旗下实验室拥有CMA/CNAS/ISO资质。
  • 标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
  • 非标测试:支持定制化试验方案。
  • 售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

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