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基因表达水平测测试

  • 原创官网
  • 2025-08-11 15:05:47
  • 关键字:北检研究院,基因表达水平测测试

相关:

概述:基因表达水平测试通过定量分析细胞内核酸或蛋白质产物,评估基因转录与翻译活性。核心检测对象包括RNA浓度、纯度及序列变异,关键项目涉及实时荧光定量PCR(qPCR)的循环阈值(Ct值)、RNA测序的覆盖深度、差异表达分析的倍数变化(|log2FC|≥1)等参数。测试涵盖样本类型如细胞、组织,确保数据准确性和可重复性,遵循国际ISO及国家标准。

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注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

因篇幅原因,CMA/CNAS证书以及未列出的项目/样品,请咨询在线工程师。

☌ 询价

检测项目

RNA提取与纯化:

  • RNA完整性检测:RIN值≥7.0(参照ISO20395:2019)
  • RNA浓度检测:浓度≥20ng/μL,A260/A280比值1.8-2.0
  • RNA纯度检测:DNA污染≤1%
cDNA合成:
  • 反转录效率:效率≥90%
  • cDNA产量:浓度≥10ng/μL
  • 引物特异性:熔解曲线单峰
实时荧光定量PCR(qPCR):
  • Ct值分析:Ct≤35,扩增效率90-110%
  • 相对定量:ΔΔCt法计算倍数变化
  • 绝对定量:拷贝数≥10copies/μL
RNA测序(RNA-seq):
  • 测序深度:≥30Mreads/sample
  • 比对率:≥90%,参考基因组GRCh38
  • 基因表达丰度:FPKM≥1.0
差异表达分析:
  • 倍数变化:|log2FC|≥1.0
  • 显著性阈值:p值<0.05,FDR校正
  • 通路富集分析:KEGG或GO数据库
miRNA表达检测:
  • miRNA浓度:≥5pg/μL
  • 特异性探针杂交:信噪比≥10:1
  • 差异miRNA筛选:|log2FC|≥2.0
蛋白质表达评估:
  • WesternBlot信号强度:灰度值线性范围
  • ELISA浓度检测:灵敏度≥1pg/mL
  • 质谱定量:肽段覆盖率≥50%
数字PCR(dPCR):
  • 绝对拷贝数:变异系数≤5%
  • 泊松分布分析:分区≥20000
  • 稀有变异检测:检测限≤0.1%
基因编辑效果验证:
  • 敲除效率:≥80%
  • 插入缺失分析:indel频率≥5%
  • 脱靶效应评估:脱靶率≤1%
甲基化表达关联:
  • 甲基化水平:β值范围0-1
  • 基因表达相关性:r≥0.7
  • 差异甲基化区域:DMR覆盖率≥90%

检测范围

1.细胞培养样本:涵盖哺乳动物细胞系如HEK293,重点检测生长因子相关基因表达动态变化。

2.组织活检样本:包括肿瘤或正常组织切片,侧重癌基因或抑癌基因的差异表达分析。

3.血液样本:全血或血清样本,焦点于免疫响应基因如细胞因子表达监控。

4.植物样本:叶片或根部组织,强调应激响应基因如干旱诱导因子表达。

5.微生物样本:细菌或真菌培养物,检测病原体耐药基因表达水平。

6.动物模型样本:转基因小鼠器官,评估特定基因过表达或敲除效果。

7.环境样本:土壤或水体微生物群落,分析功能基因表达多样性。

8.法医学样本:毛发或唾液,检测个体特异性基因表达标记。

9.药物处理样本:体外药物暴露细胞,监测药效相关基因表达变化。

10.发育生物学样本:胚胎或干细胞,聚焦发育阶段基因表达时序分析。

检测方法

国际标准:

  • ISO20395:2019分子体外诊断检测性能评价方法
  • ISO17025:2017检测和校准实验室能力的一般要求
  • ENISO15189:2022医学实验室质量和能力要求
  • ISO13485:2016医疗器械质量管理体系用于法规的要求
  • ISO9001:2015质量管理体系要求
国家标准:
  • GB/T37869-2019核酸定量检测方法通则
  • GB/T34796-2017分子生物学检测用试剂盒通用技术要求
  • GB/T27401-2008实验室质量控制规范
  • GB/T15481-2015检测和校准实验室能力认可准则
  • GB/T35428-2017高通量测序数据分析质量控制
方法差异说明:国际ISO标准侧重全球统一性,如ISO20395要求检测限≤0.1%,相较GB/T37869更严格;国家标准GB/T34796针对试剂盒稳定性,与ISO17025在实验室认证流程存在差异。

检测设备

1.实时荧光定量PCR仪:QuantStudio5(检测通道:6个,动态范围0.01-1000ng)

2.高通量测序仪:NovaSeq6000(通量:20Breads/run,读长2x150bp)

3.分光光度计:NanoDrop2000(波长范围:190-840nm,精度±1%)

4.离心机:Centrifuge5418R(转速:18000rpm,容量24x1.5mL)

5.电泳系统:GelDocXR+(分辨率:2.0MP,凝胶类型琼脂糖)

6.生物分析仪:2100Bioanalyzer(芯片类型:RNANano,检测限0.1ng/μL)

7.显微镜:BX53(放大倍数:1000x,数值孔径0.9)

8.恒温培养箱:INCOmed(温度范围:4-60°C,稳定性±0.1°C)

9.自动核酸提取仪:QIAcube(样本容量:12,提取效率≥95%)

10.冷冻离心机:AvantiJXN-26(温度:-20°C,最大速度26000rpm)

11.数字PCR系统:QX200(分区数:20000,灵敏度0.001%)

12.质谱仪:QExactiveHF(分辨率:240000,质量精度<3ppm)

13.微孔板阅读器:SpectraMaxi3x(检测模式:荧光、吸光,波长200-1000nm)

14.恒温混匀仪:ThermoMixerC(温度范围:-10-100°C,振荡频率3000rpm)

15.超低温冰箱:JianCeTFreezer(温度:-80°C,容量700L)

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

以上是与"基因表达水平测测试"相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。

    材料检测服务

    专业分析各类金属、非金属材料的成分、结构与性能,提供全面检测报告和解决方案。包括金属材料力学性能测试、高分子材料老化试验、复合材料界面分析等。

    化工产品分析

    精准检测各类化工产品的成分、纯度及物理化学性质,确保产品质量符合国家标准。服务涵盖有机溶剂分析、催化剂表征、高分子材料分子量测定等。

    环境检测服务

    提供土壤、水质、气体等环境检测服务,助力环境保护与污染治理,共建绿色家园。包括VOCs检测、重金属污染分析、水质生物毒性测试等。

    科研检测认证

    凭借专业团队和先进设备,致力于为企业研发、质量控制及市场准入提供精准可靠的技术支撑,助力品质提升与合规发展。