CFU计数测试

检测项目

样品制备：

• 稀释梯度：稀释倍数（1:10至1:1000000）、稀释液类型（生理盐水或磷酸缓冲液，参照ISO6887-1）
• 均质化参数：均质时间（30-120秒）、均质速度（≥8000rpm）

培养基配置：

• 琼脂选择：基础培养基类型（如TSA、PDA）、添加物浓度（抗生素或抑制剂，参照USP<61>）
• 灭菌条件：高压灭菌参数（121°C、15分钟）、无菌验证（阴性对照合格率100%）

培养条件：

• 温度控制：培养温度（30-37°C，精度±0.5°C）、湿度设定（≥95%RH）
• 时间设置：培养时长（24-72小时）、光照要求（避光或特定光照）

接种技术：

• 倾注法：琼脂温度（45-50°C）、混合均匀度（无气泡）
• 涂布法：涂布体积（0.1-0.2mL）、分布均匀性（参照GB4789.2）

计数方法：

• 手动计数：菌落识别标准（直径≥0.3mm）、计数器精度（误差≤5%）
• 自动计数：图像分辨率（≤0.1mm/pixel）、计数速度（≥50皿/小时）

菌落识别：

• 形态学特征：菌落颜色、形状、边缘（参照FDABAM）
• 选择性确认：特定标记（如大肠杆菌β-葡萄糖醛酸酶测试）

质量保证：

• 对照设置：阳性对照（标准菌株生长）、阴性对照（无菌生长）
• 重复性测试：平行样差异（RSD≤10%）

数据计算：

• CFU计算：公式应用（CFU/g=平均数×稀释因子）、结果报告格式（科学计数法）
• 不确定度评估：偏差范围（±0.5logCFU）

菌株差异性：

• 选择性培养基：差异因子（如麦康凯琼脂用于革兰氏阴性菌）
• 生长抑制：抑制剂效率（抑制率≥95%）

存储处理：

• 样品保存：冷藏温度（4-8°C）、时限（≤24小时）
• 废弃物处置：灭菌标准（高压121°C、30分钟）

检测范围

1.食品类样品：涵盖乳制品、肉类、果蔬，重点检测总需氧菌、大肠菌群及致病菌（如沙门氏菌）

2.饮用水样本：包括自来水、瓶装水，聚焦细菌总数、大肠杆菌及铜绿假单胞菌

3.制药产品：涉及原料药、注射液，侧重无菌检查、支原体及真菌污染

4.化妆品材料：如乳液、膏霜，重点监控微生物总数、特定病原体（如金黄色葡萄球菌）

5.环境样本：包括土壤、水体，检测异养菌群、总大肠菌及空气沉降菌

6.医疗器械：表面拭子或植入物，关注生物负载、灭菌验证残留菌

7.动物饲料：如宠物粮、饲料添加剂，重点评估霉菌毒素相关菌落

8.空气样本：沉降板或空气采样器，检测室内空气细菌总数及真菌孢子

9.生物制品：疫苗、细胞培养物，侧重活菌计数、支原体检测

10.临床样本：尿液、血液培养，重点筛查病原菌浓度及抗生素敏感性

检测方法

国际标准：

• ISO4833-1:2013食品和饲料微生物学水平方法菌落计数
• USP<61>微生物限度测试
• ISO21528-2:2017食品中肠杆菌科检测
• FDABAMChapter3需氧平板计数

国家标准：

• GB4789.2-2016食品微生物学检验菌落总数测定
• GB/T5750.12-2022生活饮用水标准检验方法微生物指标
• YY/T1537-2017医疗器械生物负载测试
• GB15979-2002一次性卫生用品卫生标准

方法差异说明：ISO4833-1规定培养温度30°C、时间72小时，而GB4789.2采用37°C、48小时；USP<61>要求特定培养基验证，GB标准强调稀释梯度控制；国际方法常用自动计数，国家标准优先手动计数。

检测设备

1.恒温培养箱：MemmertIN110型（温度范围5-70°C，精度±0.1°C）

2.自动菌落计数器：Scan500型（分辨率0.1mm，检测速度100皿/小时）

3.均质器：LabBlender400型（转速8000-15000rpm，容量50-500mL）

4.生物安全柜：BakerSG403型（洁净度ClassII，气流速度0.45m/s）

5.倒置显微镜：NikonTS100型（放大倍数40-400X，LED光源）

6.精密pH计：MettlerToledoS220型（测量范围0-14，精度±0.01）

7.分析天平：SartoriusCPA225D型（最大载荷220g，精度0.01mg）

8.移液器：EppendorfResearchPlus型（体积范围0.1-1000μL，误差≤1%）

9.水浴锅：JulaboSW23型（温度范围10-99°C，稳定性±0.05°C）

10.离心机：ThermoScientificSL16R型（转速100-16000rpm，容量6x50mL）

11.涡旋混合器：VWRMini-Vortexer型（转速300-2500rpm，定时功能）

12.稀释分配仪：DadeBehringBactiFlow型（稀释精度±1%，支持多梯度）

13.高压灭菌器：Tuttnauer3850型（压力范围0-250kPa，温度控制121°C）

14.冷藏冰箱：HaierDW-40L型（温度范围-20至20°C，容积200L）

15.空气采样器：MAS-100型（流量100L/min，收集效率≥95%）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"CFU计数测试"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。