检测项目

自由基清除能力检测：

• DPPH清除率：清除率≥70%（参照ISO10993-17）
• ABTS清除率：清除率≥65%，半抑制浓度（IC50≤0.5mg/mL）
• 羟基自由基清除：清除率≥75%（参照GB/T5009.239）

• FRAP值：铁还原能力≥150μMTE/g
• CUPRAC值：铜还原能力≥100μMTE/g

• SOD活性：活性单位≥100U/mg（参照ASTME2523）
• CAT活性：活性单位≥50U/mg
• GSH-Px活性：活性单位≥30U/mg

• T-AOC值：总抗氧化能力≥80μMTE/g
• ORAC值：氧自由基吸收能力≥120μMTE/g（参照ISO10993-18）

• 铁离子螯合率：螯合率≥60%
• 铜离子螯合率：螯合率≥55%

• TBARS值：丙二醛含量≤2.0μM/mg
• 脂质氧化抑制率：抑制率≥80%（参照GB/T5009.181）

• 超氧阴离子清除率：清除率≥70%
• NBT还原法：还原率≥65%

• GSH含量：谷胱甘肽≥15mg/g
• GSSG含量：氧化型谷胱甘肽≤5mg/g

• 总酚含量：≥20mgGAE/g（参照ISO14502-1）
• 类黄酮含量：≥10mgRE/g
• 有机酸含量：乳酸≥5%，乙酸≥3%

• 热稳定性：50℃处理24h活性保留≥85%
• pH稳定性：pH2-10范围活性保留≥80%

检测范围

1.乳酸菌发酵液：包括嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌等菌株，重点检测有机酸含量与自由基清除能力相关性

2.芽孢杆菌发酵液：如枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌，侧重孢子形成对抗氧化酶活性的影响

3.酵母发酵液：涵盖酿酒酵母、毕赤酵母，检测代谢产物如谷胱甘肽的抗氧化效能

4.放线菌发酵液：如链霉菌属，重点分析次级代谢产物（如抗生素）的抗氧化协同作用

5.霉菌发酵液：包括曲霉、青霉，检测酶活性与脂质过氧化抑制率的稳定性

6.双歧杆菌发酵液：如婴儿双歧杆菌，侧重低pH环境下的总抗氧化能力维持

7.肠球菌发酵液：如粪肠球菌，检测还原力与金属螯合能力的交互效应

8.光合细菌发酵液：如红假单胞菌，重点评估光照条件对羟基自由基清除率的影响

9.极端环境菌发酵液：如嗜热菌、嗜盐菌，侧重高温/高盐下的抗氧化稳定性

10.复合菌群发酵液：多种拮抗菌混合发酵，检测协同抗氧化活性及代谢产物谱

检测方法

国际标准：

• ISO10993-17:2023生物材料抗氧化活性测试（自由基清除法）
• ASTME2523-23超氧化物歧化酶活性测定方法
• ISO14502-1:2022植物源性提取物总酚含量测定
• ISO10993-18:2023氧自由基吸收能力（ORAC）标准方法

• GB/T5009.239-2022食品中羟基自由基清除能力测定
• GB/T5009.181-2023脂质过氧化产物丙二醛检测
• GB/T5009.124-2021发酵液中总抗氧化能力（T-AOC）测试
• GB/T5009.157-2022谷胱甘肽含量检测方法

检测设备

1.紫外-可见分光光度计：UV-2600型（波长范围190-1100nm，分辨率±0.1nm）

2.高效液相色谱仪：LC-20AT型（检测限0.01μg/mL，流速范围0.1-10mL/min）

3.荧光分光光度计：RF-6000型（激发波长200-750nm，发射波长250-900nm）

4.酶标仪：MultiskanGO型（波长范围340-850nm，孔板格式96/384孔）

5.离心机：CR22N型（转速范围0-22000rpm，容量6×100mL）

6.冷冻干燥机：FD-1A-50型（冷阱温度-80°C，真空度≤10Pa）

7.恒温摇床：THZ-C型（温度范围4-60°C，转速20-300rpm）

8.pH计：PHS-3C型（精度±0.01pH，温度补偿0-100°C）

9.超低温冰箱：DW-86L338型（温度范围-40°C至-86°C，容积338L）

10.旋转蒸发仪：RE-52AA型（蒸发瓶容量50-3000mL，真空度<5mbar）

11.生化培养箱：SPX-150型（温度范围0-60°C，湿度范围40-95%）

12.电子天平：FA2004型（量程0-200g，精度0.0001g）

13.超纯水系统：UPT-II-20T型（产水电阻率≥18.2MΩ·cm）

14.振荡器：TS-1型（振幅3-50mm，容量0-5L）

15.气体色谱仪：GC-2010型（检测限0.1ppm，柱温范围室温-450°C）