酒类微生物污染检测

检测项目

1.总需氧菌落计数：检测限≤10CFU/mL，培养温度30±1°C，时间48±2小时

2.大肠菌群检测：MPN法，限值<3MPN/100mL，确认试验需乳糖发酵

3.酵母和霉菌计数：检测限≤100CFU/mL，培养基pH5.6±0.2，培养时间5天

4.乳酸菌检测：平板计数法，限值<100CFU/mL，厌氧培养温度37±1°C

5.醋酸菌检测：检测限≤50CFU/mL，需乙醇添加量5-10%，培养温度30°C

6.沙门氏菌筛查：阴性/阳性判定，增菌时间24小时，确认试验包括血清学检测

7.李斯特菌检测：阴性/阳性判定，增菌温度30°C，时间48小时，生化鉴定

8.黄曲霉毒素B1测定：限值≤5μg/kg，回收率要求85-115%，检测波长365nm

9.赭曲霉毒素A测定：限值≤2μg/kg，检测灵敏度0.1μg/kg，流动相甲醇-水

10.生物胺检测：如组胺限值≤10mg/L，衍生化反应时间30分钟，HPLC分离

11.厌氧菌计数：检测限≤50CFU/mL，厌氧环境氧气<0.1%，培养时间72小时

12.酒精耐受性酵母检测：检测限≤100CFU/mL，酒精浓度10-15%，培养温度25°C

检测范围

1.白酒：高酒精含量产品（40-60%vol），重点检测耐酒精微生物和残留毒素

2.啤酒：发酵饮料（4-6strong>发酵饮料（4-6%vol），关注酵母污染、大肠菌群和厌氧菌

3.葡萄酒：果酒类（12-15%vol），检测醋酸菌、霉菌和生物胺

4.黄酒：传统发酵酒（14-20%vol），侧重乳酸菌、真菌毒素和总菌落

5.果酒：如苹果酒或樱桃如苹果酒或樱桃酒（5-12%vol），检测酵母、霉菌和致病菌

6.米酒：糯米发酵产品（15-20%vol），关注总菌落计数和大肠菌群

7.烈酒：如威士忌或伏特加（40-50%vol），检测残留微生物和毒素限值

8.配制酒：混合酒精饮料（10-30%vol），全面筛查致病菌和真菌污染

9.酒精饮料：低度酒（<5%vol），重点检测大肠菌群和酵母

10.发酵液：生产中间体（未灭菌），监控微生物生长和污染指标

11.清酒：>11.清酒：日本米酒（15-20%vol），特定检测乳酸菌和厌氧菌

12.起泡酒：如香槟（12%vol），检测酵母活性和总需氧菌落

检测方法

国际标准：

ISO4833-1:2013食品微生物学-水平法菌落计数

ISO21528-2:2017食品微生物学-肠杆菌科检测和计数

ISO7954:1987酵母和霉菌计数通用指南

ISO11290-1:2017单核细胞增生李斯特菌检测方法

ISO16050:2003食品中黄曲霉毒素B1测定

ISO21807:2004食品中赭曲霉毒素A检测

ISO15214:1998乳酸菌计数方法

ISO10272-1:2017食品中沙门氏菌检测

ISO13720:2010肉制品中生物胺测定

ISO17410:2019微生物学-厌氧菌计数

国家标准：

GB4789.2-2016食品微生物学检验菌落总数测定

GB4789.3-2016食品微生物学检验大肠菌群计数

GB4789.15-2016食品微生物学检验霉菌和酵母计数

GB4789.30-2016食品微生物学检验单核细胞增生李斯特菌检验

GB5009.22-2016食品中黄曲霉毒素B1测定

GB5009.96-2016食品中赭曲霉毒素A测定

GB4789.35-20164789.35-2016食品微生物学检验乳酸菌检验

GB4789.4-2016食品微生物学检验沙门氏菌检验

GB5009.208-2016食品中生物胺的测定

GB4789.34-2016食品微生物学检验双歧杆菌检验（适配厌氧菌）

检测设备

1.恒温培养箱：型号INC-200.温度范围20-60°C，精度±0.5°C，用于微生物培养

2.生物

2.生物显微镜：型号MIC-400.放大倍数40-1000X，配备油镜，用于形态学鉴定

3.实时荧光定量PCR仪：型号PCR-500.检测灵敏度1copy/μL，支持多重病原体筛查

4.酶标仪：型号ELISA-300.波长范围400-700nm，用于毒素和抗原检测

5.离心机：型号CEN-150.最大转速15000rpm，容量6×50mL，用于样品分离

6.膜过滤系统：型号FIL-100.孔径0.45μm，流量100mL/min，用于菌液浓缩

7.生物安全柜：型号BSC-200.ClassIIA2，气流速度0.5m/s，保障无菌操作

8.自动菌落计数器：型号ACC-250.图像分析精度±1%，支持CFU自动统计

9.气相色谱-质谱联用仪：型号GCMS-800.检测限0.01μg/kg，用于真菌毒素定量

10.厌氧培养系统：型号ANA-350.氧气控制<0.1%，温度范围25-45°C，用于厌氧菌培养

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】