可送检的样品类型与对应检测项目

样品类型 典型应用场景 主要检测项目 常用方法 / 参考
水源水与生活饮用水 供水企业原虫常规监测、水源地卫生风险评估、供水设施水质评价 隐孢子虫卵囊与贾第鞭毛虫包囊的浓缩分离、免疫荧光镜检计数、活力染色鉴别 GB/T 5750.12-2023;免疫磁分离(IMS)、免疫荧光(IFA)、DAPI/PI活力染色
实验动物及其粪便、垫料、血液 实验动物寄生虫学等级监测、SPF动物质量分级、种群净化评估 肠道鞭毛虫与纤毛虫镜检、疟原虫血涂片检查、兔脑原虫检测、寄生虫学等级评定 GB 14922-2022;GB/T 18448.10-2001、GB/T 18448.7-2001、GB/T 18448.3-2001
畜禽与宠物临床样本(粪便、血液、组织) 原虫病诊断、流行病学调查、驱虫效果评价 隐孢子虫核酸扩增检测、利什曼原虫病原学检查、球虫卵囊镜检与计数 GB/T 35942-2018;GB/T 47221-2026
环境样本(活性污泥、受纳水体) 污水生化处理工艺评估、化学品生态毒理研究、原生动物群落监测 原生动物群落组成观察计数、活性污泥原生动物抑制试验 GB/T 42367-2023
分子鉴定样本(虫体、包囊、核酸提取物) 不明原虫物种鉴定、近缘种区分、系统发育研究 18S rRNA与内转录间隔区片段扩增、测序、数据库比对与种属判定 GB/T 39367-2025(基于核酸扩增的病原微生物检测和鉴定程序实验室质量实践通则)

检测项目

1. 形态学种属鉴定:光学显微镜明场与相差观察,油镜1000倍下测量虫体大小,如隐孢子虫卵囊直径4~6μm、贾第鞭毛虫包囊8~12μm×7~10μm、结肠小袋纤毛虫30~150μm

2. 免疫荧光镜检计数:FITC标记单克隆抗体染色,卵囊与包囊计数范围1~1000个/10L,方法检出限可低至1个/10L水样

3. 核酸扩增鉴定:针对18S rRNA、内转录间隔区或线粒体基因片段,常规PCR与实时荧光定量PCR均可,扩增效率90%~110%

4. 测序比对与种属判定:扩增子双向测序,有效序列与参考序列相似度≥99%判定到种,97%~99%判定到属,并给出系统发育地位

5. 活力与感染性评估:DAPI/PI双染色鉴别活死卵囊,活力率报告范围0~100%,为消毒工艺评价提供依据

检测范围

1. 顶复门原虫:隐孢子虫(微小隐孢子虫、安氏隐孢子虫等)、疟原虫(间日疟原虫、恶性疟原虫等)、刚地弓形虫、艾美耳属球虫

2. 鞭毛虫类:十二指肠贾第虫(A~G基因型集合种)、利什曼原虫、伊氏锥虫、阴道毛滴虫

3. 纤毛虫类:结肠小袋纤毛虫、草履虫、钟虫、累枝虫等活性污泥指示纤毛虫

4. 阿米巴类:溶组织内阿米巴、棘阿米巴、福氏耐格里阿米巴

5. 微孢子虫类:兔脑原虫(脑炎微孢子虫)、毕氏肠微孢子虫

检测方法

1. GB/T 5750.12-2023 生活饮用水标准检验方法 第12部分:微生物指标(隐孢子虫卵囊和贾第鞭毛虫的免疫磁分离与免疫荧光检测)

2. GB/T 35942-2018 隐孢子虫套式PCR检测方法

3. GB/T 18448.10-2001 实验动物 肠道鞭毛虫和纤毛虫检测方法

4. GB/T 18448.7-2001 实验动物 疟原虫检测方法

5. GB/T 18448.3-2001 实验动物 兔脑原虫检测方法

6. GB 14922-2022 实验动物 微生物、寄生虫学等级及监测

7. GB/T 47221-2026 利什曼原虫病诊断技术

8. GB/T 42367-2023 化学品 原生动物活性污泥抑制试验

9. GB/T 39367-2025 体外诊断检测系统 基于核酸扩增的病原微生物检测和鉴定程序 实验室质量实践通则

检测设备

1. 研究级生物显微镜:物镜4×~100×油镜,总放大40~1000倍,配明场与相差观察模块

2. 荧光显微镜:FITC激发模块465~495nm、DAPI模块330~380nm,配高灵敏度制冷相机

3. 实时荧光定量PCR仪:96孔通量,温控范围4~99℃,控温精度±0.2℃,荧光通道≥4色

4. 梯度PCR仪:退火温度梯度跨度±30℃,温控精度±0.2℃

5. 全自动磁珠法核酸提取仪:通量32~96管,洗脱体积30~100μL,内置裂解与洗涤程序

6. 免疫磁分离装置:磁力架配合原虫专用免疫磁珠,卵囊捕获效率评价≥70%

7. 大体积水样过滤富集装置:滤膜孔径1~5μm,单次处理量10~100L,配压力与流量监控

8. 高速冷冻离心机:最大相对离心力≥20000×g,温控范围-20~40℃

9. 凝胶成像分析系统:UV与蓝光双透射,纳克级核酸条带可辨

10. 生物安全柜:二级A2型,操作面洁净度百级,保障病原样本操作安全