检测项目
1.形态特征鉴定:体长0.8-1.2mm,触角7节(第Ⅲ节具叉状感觉锥),前胸背板后缘鬃毛数量≥3对
2.分子生物学检测:COI基因序列比对(GenBank数据库),ITS1/ITS2区域扩增(引物TpalF:5'-CGAACCTGGGATTAGAT-3')
3.寄主植物关联性分析:刺吸式口器残留物PCR检测(灵敏度≥0.1ng/μL)
4.种群密度测定:黄板诱集法(25cm30cm标准板单日捕获量≥50头)
5.抗药性监测:毒力生物测定(LC50值测定采用点滴法,药剂浓度梯度0.01-100mg/L)
检测范围
1.新鲜果蔬类:黄瓜、茄子、辣椒等茄科作物果实及叶片样本
2.切花及观赏植物:菊花、玫瑰等花卉植株及运输包装材料
3.仓储农产品:干制辣椒、脱水蔬菜等加工制品
4.入境检疫物:进境苗木、接穗等繁殖材料
5.土壤及栽培介质:温室大棚表层土(深度0-15cm)
检测方法
1.ISO/IEC17025:2017《实验室质量体系规范》第5.4.5条款(显微鉴定流程控制)
2.GB/T27635-2011《植物检疫昆虫分子检测规范》(实时荧光定量PCR阈值循环数≤35)
3.ASTME1752-17《昆虫抗药性生物测定标准指南》(温度251℃,湿度705%)
4.SN/T2039-2007《进出境植物检疫抽样方法》(批量≤50件全数检验)
5.EPPOPM7/129(1)国际标准《蓟马科检疫性害虫诊断规程》(体视显微镜放大倍率40-100)
检测设备
1.OlympusBX53研究级显微镜:配备DP27数码成像系统(物镜UPlanFLN10/0.30)
2.Bio-RadT100ThermalCyclerPCR仪:支持梯度PCR(温控精度0.1℃)
3.Agilent4200TapeStation系统:DNA/RNA完整性检测(DIN值≥7.0)
4.LeicaM205C体视显微镜:20:1变焦比(最大分辨率768576像素)
5.ThermoScientificMultiskanSkyHigh酶标仪:波长范围340-850nm(吸光度精度1%)
6.SartoriusQuintix224-1CN分析天平:称量精度0.1mg(最大载荷220g)
7.EppendorfCentrifuge5430R高速离心机:转速300-30,000rpm(温控范围-20℃至40℃)
8.MemmertIPP110培养箱:温度范围0-70℃(均匀度0.3℃)