检测项目

1. 理化特性检测：

• 渗透压摩尔浓度：290-330 mOsm/kg（参照ISO 10993-3）
• pH值范围：7.2-7.6（±0.1偏差）
• 电导率：≤15 mS/cm（25℃）

• DMSO浓度：10.0±0.5%（v/v）（HPLC法）
• 甘油含量：5-10%（w/v）（酶比色法GB/T 5009.7）
• 蔗糖/海藻糖定量：50-100mM（离子色谱法）

• 无菌检查：符合EP 2.6.1微生物限度
• 细菌内毒素：≤0.5 EU/mL（凝胶法GB/T 14233.2）
• 支原体检测：PCR法（ISO 17025）

• 复苏存活率：≥90%（台盼蓝排斥法）
• 贴壁效率：≥85%（24h培养观察）
• 膜完整性：LDH释放率≤5%（参照ASTM F1903）

• 血清蛋白残留：≤0.5μg/mL（ELISA法）
• 生长因子活性：ED50值偏差±10%（细胞增殖法）
• 抗氧化剂浓度：谷胱甘肽0.5-1.0mM（HPLC-UV）

• 玻璃化转变温度：≤-120℃（DSC测定）
• 冰晶形成温度：过冷度≥10℃
• 复温速率：≥100℃/min（程序降温仪记录）

• 加速稳定性：40℃/75%RH下有效成分保留率≥95%
• 冻融循环：3次循环后渗透压变化≤5%
• 长期储存：-196℃/12月细胞存活率衰减≤3%

• 重金属残留：Pb≤0.1ppm, Cd≤0.05ppm（ICP-MS法）
• 有机溶剂残留：乙醇≤500ppm（GC-FID）
• 游离醛类：≤0.1μM（DNPH衍生化）

• 克隆形成率：≥80%（ISO 13095）
• 分化潜能维持：多能性标记物表达≥95%
• 染色体稳定性：核型正常率≥98%

• 浸出物检测：非挥发性残留≤0.1μg/cm²（USP <1663>）
• 密封完整性：≥-80kPa负压保持（ASTM F2338）
• 低温脆性：-196℃冲击无破裂（GB/T 5470）

检测范围

1. 基础型冻存液： 含DMSO/血清配方，重点检测保护剂梯度稳定性及血清残留

2. 无血清冻存液： 合成聚合物体系，侧重渗透压精确控制及细胞毒性筛查

3. 无蛋白冻存液： 化学成分明确配方，强化内毒素控制及渗透压稳定性验证

4. 干细胞专用冻存液： 含多能性维持因子，核心检测分化潜能及表观遗传稳定性

5. 免疫细胞冻存液： 含IL-2等细胞因子，聚焦复苏后杀伤活性及增殖能力

6. 原代细胞冻存液： 针对肝细胞/神经元等，检测特定功能标志物保留率

7. 胚胎冻存液： 玻璃化溶液体系，严控冰晶形成温度及复苏存活率

8. 组织冻存液： 高粘度渗透型配方，重点检测三维结构完整性

9. 基因修饰细胞冻存液： 含转染试剂中和剂，检测基因表达稳定性

10. 自动化冻存系统耗材： 预装式冻存袋/冻存管，强化浸出物及密封性测试

检测方法

国际标准：

• ISO 10993-5:2009 医疗器械细胞毒性评价
• USP <85> 细菌内毒素测试
• EP 2.6.27 细胞基质产品支原体检测
• ASTM E2945-14 冻存细胞复苏存活率测定

• GB/T 14233.2-2021 医用输液器具生物试验方法
• GB/T 16886.5-2017 医疗器械生物学评价第5部分
• YY/T 0878-2022 细胞冻存袋通用要求
• GB 5009.268-2016 食品中多元素测定（ICP-MS法）

检测设备

1. 全自动渗透压仪： Advanced 3320型（测量范围0-3000 mOsm/kg，精度±2 mOsm/kg）

2. 高效液相色谱仪： Agilent 1260 Infinity II（DAD检测器，定量限0.01μg/mL）

3. 气相色谱质谱联用仪： Thermo ISQ 7000（ECD检测器，分辨率0.1ppm）

4. 电感耦合等离子体质谱仪： PerkinElmer NexION 2000（检出限0.01ppt）

5. 全自动微生物检测系统： BACTEC FX40（培养瓶灵敏度≥1CFU）

6. 程序降温仪： CryoMed 1010（降温速率0.1-100℃/min）

7. 差示扫描量热仪： TA Q2000（温度范围-180~725℃，精度±0.1℃）

8. 流式细胞仪： BD FACSymphony A5（5激光30色，检测限≤0.1μm微粒）

9. 全自动细胞计数仪： Countstar Rigel S2（双荧光通道，CV≤3%）

10. 多功能酶标仪： BioTek Synergy H1（检测波长200-999nm，OD精度±1%）

11. 超低温储存箱： Thermo -150℃（温度均一性±3℃）

12. 液氮储存系统： Chart MVE XC47/11（容积470L，液氮消耗≤0.5L/day）

13. 真空密封测试仪： PTI VeriPac 455（检测灵敏度5μm泄漏）

14. 细胞克隆成像系统： Olympus Provi CM20（自动计数精度≥99%）

15. 实时细胞分析仪： ACEA xCELLigence RTCA（阻抗检测频率10kHz-10MHz）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

　　以上是与细胞冻存液检测相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。