检测项目

细胞活力检测：

• MTT法：吸光度OD值（范围0.1-3.0，参照ISO 10993-5）
• 台盼蓝染色：活细胞百分比（≥95%）
• Calcein-AM/PI双染：绿色/红色荧光比值

• 支原体检测：PCR法（检出限≤10 copies/μL）
• 细菌检测：培养法（CFU计数≤1 CFU/mL）
• 真菌检测：显微镜观察（孢子形态评分）

• 自动细胞计数：细胞浓度（cells/mL，精度±5%）
• 生长曲线：倍增时间（小时，参照ATCC指南）
• BrdU掺入：增殖指数（%）

• Annexin V/PI染色：凋亡率（%，早期/晚期区分）
• LDH释放：坏死百分比（≤10%）
• Caspase-3活性：荧光强度（RFU）

• 葡萄糖消耗：浓度（mmol/L，检测限0.1mmol/L）
• 乳酸产生：浓度（mmol/L，范围0-20mmol/L）
• 氧消耗率：OCR值（pmol/min/μg蛋白）

• qRT-PCR：Ct值（内参基因GAPDH）
• Western blot：蛋白表达量（灰度值分析）
• RNA-Seq：差异基因数

• 迁移试验：伤口愈合率（%，参照Scratch assay）
• 侵袭试验：穿透细胞数（Matrigel法）
• 吞噬功能：荧光微球摄入率

• 流式细胞术：阳性细胞百分比（抗体CD标记）
• 免疫荧光：荧光强度（共聚焦成像）
• ELISA：可溶性因子浓度（pg/mL）

• 内毒素检测：LAL法（EU/mL，≤0.5EU/mL）
• 微生物限度：培养法（14天观察）
• 病毒检测：PCR法（检出限≤50 copies/mL）

• 显微镜观察：形态评分（1-5级）
• 细胞大小：直径（μm，范围10-50μm）
• 贴壁效率：附着细胞百分比（≥80%）

检测范围

1. 贴壁细胞系： 涵盖HEK293、HeLa等，检测重点在贴壁效率、形态完整性和生长曲线稳定性。

2. 悬浮细胞系： 包括Jurkat、U937等，检测重点在细胞聚集度、活力维持和代谢参数。

3. 原代细胞： 如人皮肤成纤维细胞或肝细胞，检测重点在传代稳定性、纯度验证和功能特性。

4. 干细胞： 涉及hESC、iPSC等，检测重点在多能性标记（如OCT4表达）、分化潜能和核型分析。

5. 3D细胞培养： 如球体或类器官，检测重点在结构直径（100-500μm）、内部细胞分布和代谢梯度。

6. 共培养系统： 如肿瘤-免疫细胞模型，检测重点在细胞相互作用、细胞因子分泌和杀伤效率。

7. 病毒生产细胞： 如HEK293T，检测重点在转染效率（≥70%）、病毒滴度（PFU/mL）和细胞健康。

8. 生物反应器培养： 如微载体系统，检测重点在放大参数、溶氧控制和细胞密度（cells/mL）。

9. 冷冻细胞： 如液氮存储样本，检测重点在复苏活力（≥90%）、冻存液残留和遗传稳定性。

10. 基因编辑细胞： 如CRISPR修饰细胞，检测重点在编辑效率（indel%）、脱靶效应和表型验证。

检测方法

国际标准：

• ISO 10993-5: 体外细胞毒性测试（MTT法培养24-72小时）
• USP <71>：无菌测试（培养14天，温度20-25°C）
• ISO 17025：检测实验室通用要求（数据可追溯性）
• ISO 14644-1：洁净室环境控制（粒子计数≤3520/m³）

• GB/T 16886.5：医疗器械生物学评价（细胞毒性分级）
• GB/T 37846：细胞培养无菌操作规范（生物安全柜使用）
• GB/T 34796：支原体检测方法（PCR vs培养法灵敏度差异）
• GB/T 33215：细胞计数标准（自动计数精度要求）

检测设备

1. 倒置显微镜： Olympus IX83（放大倍数40-1000x，荧光通道）

2. 流式细胞仪： BD FACSAria III（检测通道18色，流速1-60μL/min）

3. 实时PCR仪： Thermo Fisher QuantStudio 7（温度范围4-99°C，精度±0.1°C）

4. 酶标仪： BioTek Synergy H1（波长范围200-999nm，检测模式双光路）

5. 自动细胞计数器： Countess II FL（计数范围10^4-10^7 cells/mL，荧光兼容）

6. CO2培养箱： Thermo Scientific Heracell 240i（CO2控制5-20%，温度±0.1°C）

7. 生物安全柜： Esco Airstream（风速0.3-0.5m/s，HEPA过滤）

8. 高速离心机： Eppendorf 5430R（最大转速15000rpm，温控范围-10-40°C）

9. 电泳系统： Bio-Rad Mini-PROTEAN Tetra（电压范围10-300V，凝胶尺寸8x10cm）

10. 程序降温仪： CryoMed 7400（降温速率0.1-10°C/min，容量100支）

11. 荧光显微镜： Leica DMi8（共聚焦模块，激光波长405-640nm）

12. 生物反应器： Sartorius Biostat STR（体积范围1-50L，溶氧控制0-100%）

13. pH计： Mettler Toledo SevenExcellence（精度±0.01，温度补偿）

14. 精密天平： Sartorius Cubis（量程0.001g-220g，精度0.1mg）

15. 恒温水浴锅： Memmert WNB14（温度范围5-99°C，精度

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

　　以上是与细胞培养检测相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。