酵母菌代谢组学测试

酵母菌代谢组学测试聚焦于酵母菌细胞代谢物全谱分析,核心检测对象包括初级代谢物、次级代谢物及酶活性等关键生物分子。采用高通量技术如质谱联用方法,量化氨基酸、有机酸、脂质等参数,评估代谢通路动态变化和应激响应。测试涵盖代谢物浓度、代谢通量及氧化还原状态,遵循国际规范化标准,确保数据精度和生物学重现性,为菌株优化和功能研究提供基础支撑。

原创阅读 62025-07-18工程师CMACNASISO高新技术企业

检测项目

初级代谢物检测:

  • 氨基酸定量:浓度范围(0.1-100μM),回收率(≥95%,参照ISO13903)
  • 有机酸分析:草酸、柠檬酸含量(检出限≤0.01μM),pH稳定性(5.0-7.0)
  • 碳水化合物检测:葡萄糖、果糖水平(相对标准偏差≤2%)
次级代谢物检测:
  • 色素分析:类胡萝卜素浓度(吸光度450nm≥0.5)
  • 抗生素代谢物:青霉素类似物含量(定量限0.05μg/mL)
  • 毒素筛查:黄曲霉毒素B1(检出限≤0.1ppb)
酶活性检测:
  • 脱氢酶活力:比活性(U/mg蛋白,参照ISO20665)
  • 氧化还原酶:催化效率(kcat≥100s⁻¹)
  • 水解酶:底物特异性(Km值0.1-10mM)
脂质组学检测:
  • 脂肪酸谱:饱和脂肪酸比例(C16:0占比≥30%)
  • 磷脂分析:磷脂酰胆碱含量(相对丰度误差≤5%)
  • 固醇检测:麦角固醇浓度(标准曲线R²≥0.99)
核苷酸检测:
  • ATP水平:能量状态指数(浓度0.5-5mM)
  • 核苷酸碱基:腺嘌呤、鸟嘌呤含量(分离度≥1.5)
  • 辅酶分析:NAD+/NADH比值(氧化还原平衡1.0-2.0)
氧化应激标志物检测:
  • 活性氧物种:超氧阴离子水平(荧光强度≥1000AU)
  • 抗氧化酶:超氧化物歧化酶活性(抑制率≥80%)
  • 脂质过氧化:丙二醛含量(标准范围0.1-1.0μM)
维生素检测:
  • 水溶性维生素:B族维生素浓度(回收率≥90%)
  • 脂溶性维生素:维生素E含量(定量限0.01μg/mL)
  • 辅因子分析:生物素水平(线性范围0.05-50μM)
激素检测:
  • 细胞信号分子:环腺苷酸浓度(灵敏度≤1pM)
  • 生长调节剂:赤霉素类似物含量(相对偏差≤3%)
  • 应激激素:脱落酸水平(校准曲线斜率0.9-1.1)
代谢通量分析:
  • 碳通量:¹³C标记葡萄糖代谢率(通量值≥0.5mmol/gDCW/h)
  • 氮通量:¹⁵N标记氨基酸同化(同位素富集度≥98%)
  • 氧消耗:呼吸速率(μmolO₂/min/mg蛋白)
细胞组分检测:
  • 胞内代谢物:总代谢物提取效率(≥95%)
  • 细胞壁组分:β-葡聚糖含量(多糖纯度≥90%)
  • 膜通透性:荧光染料渗透率(时间常数≤10s)

检测范围

1.酿酒酵母菌株:涵盖Saccharomycescerevisiae标准株,重点检测酒精发酵相关代谢物及酶活性动态

2.面包酵母培养物:工业烘焙用酵母,侧重碳水化合物代谢效率和氧化应激响应

3.裂殖酵母样本:Schizosaccharomycespombe模型,检测DNA合成相关核苷酸及细胞周期代谢物

4.致病酵母分离株:如Candidaalbicans临床株,聚焦毒力因子次级代谢物及耐药性标志物

5.重组酵母工程菌:基因修饰菌株,检测外源蛋白表达影响下的代谢通量偏移

6.工业发酵酵母:生物反应器培养样品,重点监控脂质积累和产物抑制效应

7.野生型酵母环境样本:自然环境分离株,检测适应性代谢物如渗透保护剂水平

8.突变体酵母库:基因敲除或过表达株,评估特定代谢通路缺失或增强的分子变化

9.酵母菌固定化产品:载体固定细胞,检测传质限制下的局部代谢物浓度梯度

10.酵母提取物制品:商业化裂解产物,侧重水溶性维生素和核苷酸的定量稳定性

检测方法

国际标准:

  • ISO20665:2018微生物代谢物定量分析通则
  • ISO13903:2005氨基酸测定标准方法
  • ASTME2520-22脂质组学质谱联用技术规范
国家标准:
  • GB/T35882-2018酵母菌代谢组学检测通用要求
  • GB/T22400-2021高效液相色谱法测定核苷酸
  • GB/T41404-2022气相色谱-质谱联用代谢物筛查方法
(方法差异说明:ISO标准强调全球一致性,ASTM侧重设备参数校准;GB标准调整了样品前处理步骤以适应国内实验室条件,如代谢物提取溶剂比例差异)

检测设备

1.液相色谱-质谱联用仪:Agilent6495C型(质量精度≤2ppm,流速范围0.1-2mL/min)

2.气相色谱-质谱联用仪:ThermoScientificISQ7000型(检测限≤0.1pg,柱温范围40-400°C)

3.核磁共振光谱仪:BrukerAvanceIII600MHz型(分辨率≥0.001ppm,场强14.1T)

4.高效液相色谱仪:WatersACQUITYUPLCH-Class型(压力上限15000psi,流通池光程10mm)

5.酶标仪:BioTekSynergyH1型(波长范围200-1000nm,精度±1%)

6.超速离心机:BeckmanCoulterOptimaXE-100型(最大转速100000rpm,温控±0.5°C)

7.恒温培养箱:MemmertINCO153型(温度范围5-80°C,均匀度±0.2°C)

8.荧光显微镜:OlympusIX83型(分辨率0.2μm,激发波长365-640nm)

9.生化分析仪:Hitachi7180型(检测通量≥400样/小时,试剂消耗≤50μL)

10.离子色谱仪:Metrohm930型(电导检测限≤0.1μS/cm,流速精度±0.5%)

11.紫外-可见分光光度计:ShimadzuUV-2600型(波长准确度±0.3nm,带宽0.1-5nm)

12.冷冻干燥机:LabconcoFreeZone6型(真空度≤0.001mbar,冷阱温度-84°C)

13.细胞破碎仪:SonicsVCX750型(功率输出50-750W,频率20kHz)

14.微孔板振荡器:EppendorfMixMate型(转速范围100-3000rpm,定时精度±1s)

15.电化学工作站:CHInstruments660E型(电位范围±10V,电流分辨率100fA)

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

  • 报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
  • 检测周期:7~15工作日,可加急。
  • 资质:旗下实验室拥有CMA/CNAS/ISO资质。
  • 标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
  • 非标测试:支持定制化试验方案。
  • 售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

QUALIFICATIONS

旗下实验室 · 资质荣誉

CMA / CNAS / ISO 资质齐全,荣誉证书点击可查看大图

{{ groups[lb.g].items[lb.i].t }}({{ lb.i+1 }} / {{ groups[lb.g].items.length }})

具体资质详情请联系工程师

北京实验室 济南实验室 聊城实验室 深圳实验室

热门检测专题