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心脏灌流心肌细胞脂肪酸氧化测试

  • 原创官网
  • 2025-07-26 12:08:45
  • 关键字:北检研究院,心脏灌流心肌细胞脂肪酸氧化测试

相关:

概述:心脏灌流心肌细胞脂肪酸氧化测试是一种评估心肌细胞能量代谢的核心技术,通过模拟生理灌流环境,量化脂肪酸底物氧化过程。核心检测对象为离体心肌细胞在灌流体系中的β-氧化活性,关键项目包括脂肪酸氧化速率(μmol/min/g 组织)、酰基肉碱积累量(nmol/mg 蛋白)、ATP生成效率(μmol/min)及线粒体呼吸控制率(RCR≥4.0)。该测试采用同位素示踪和代谢产物分析,揭示心肌细胞能量底物利用能力,为心血管疾病代谢机制研究提供精准数据。

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注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

因篇幅原因,CMA/CNAS证书以及未列出的项目/样品,请咨询在线工程师。

☌ 询价

检测项目

脂肪酸氧化动力学检测:

  • 氧化速率测定:初始速率(μmol/min/g,参照ISO15197)、稳态通量(变化率±5%)
  • 底物消耗分析:棕榈酸酯利用率(回收率≥95%)、油酸酯转化率(偏差≤0.1μM)
代谢物浓度检测:
  • 酰基肉碱谱:C16:0肉碱(浓度范围0.1-10nmol/mL)、C18:1肉碱(检测限0.05nmol/mL)
  • 能量产物量化:ATP生成量(μmol/mg蛋白)、ADP/ATP比率(标准值0.8-1.2)
酶活性测定:
  • β-氧化酶系:CPT1活性(U/mg,参照ASTME1484)、ACADVL活性(变化率±2%)
  • 脱氢酶检测:LCAD活性(Km值0.5mM)、VLCAD活性(Vmax≥100nmol/min)
能量状态评估:
  • 线粒体功能:呼吸控制率(RCR≥4.0)、质子漏率(百分比≤10%)
  • 氧化磷酸化效率:P/O比率(标准值2.5-3.0)、耦合度(偏差±0.1)
细胞功能测试:
  • 膜完整性检测:乳酸脱氢酶泄漏率(%活性,参照GB/T16886)、细胞存活率(≥90%)
  • 收缩功能分析:收缩幅度(μm)、频率(bpm,标准60-100)
氧化应激指标:
  • 自由基水平:ROS生成量(荧光强度单位,检测限10RFU)、MDA浓度(nmol/mg)
  • 抗氧化能力:SOD活性(U/mg,标准≥50)、GSH含量(μmol/g)
基因表达分析:
  • 代谢基因:PPARα表达量(foldchange±0.5)、CPT1BmRNA水平(Ct值偏差≤1)
  • 调控因子:PGC1α表达(相对量,标准1.0-2.0)、SIRT3水平(变化率±3%)
蛋白质组学检测:
  • 氧化酶定量:ACADM蛋白量(μg/mL,参照ISO10993)、ETFDH丰度(偏差±0.2)
  • 磷酸化状态:p-AMPK水平(相对强度,标准≥1.5)、ACC磷酸化率(百分比)
信号转导通路:
  • AMPK通路:磷酸化效率(活性比≥2.0)、mTOR抑制率(%变化)
  • 钙信号检测:胞内钙浓度(nM,标准100-200)、钙瞬变幅度(ΔF/F0)
药物代谢响应:
  • 药物效应:曲美他嗪抑制率(IC50值μM)、肉碱增强效率(倍增值±0.1)
  • 毒性评估:细胞凋亡率(%)、坏死指数(标准≤5%)

检测范围

1.人心肌细胞原代培养物:涵盖成年及胎儿来源,重点检测病理状态(如缺血)下的脂肪酸氧化效率及代谢紊乱。

2.大鼠心肌组织切片:使用离体灌流模型,侧重氧化动力学参数及药物干预响应评估。

3.猪心脏灌流全器官:模拟生理条件,核心检测脂肪酸底物利用能力及能量代谢平衡。

4.转基因小鼠心肌细胞:针对PPARα或CPT1B基因修饰模型,重点分析基因表达对氧化过程的影响。

5.病理模型细胞(缺血再灌注):涵盖缺氧复氧处理,检测氧化应激指标及膜功能损伤。

6.药物处理心肌细胞:暴露于降脂药或代谢调节剂,侧重药物代谢响应及毒性阈值。

7.老年化心肌细胞培养:源自衰老模型,重点评估氧化速率衰减及线粒体功能障碍。

8.干细胞分化心肌细胞:使用iPSC诱导,核心检测分化后脂肪酸氧化成熟度及功能一致性。

9.3D心肌组织工程模型:模拟体内微环境,侧重细胞-基质交互作用下的代谢通量。

10.临床心肌活检样本:来自心血管疾病患者,重点分析脂肪酸氧化缺陷及诊断相关性。

检测方法

国际标准:

  • ISO15197:2013体外诊断测试系统
  • ASTME1484-22酶活性测定方法
  • ISO10993-5:2009生物相容性评估
国家标准:
  • GB/T16886.5-2017医疗器械生物学评价
  • GB/T38146.1-2019细胞培养技术规范
  • GB/T27417-2017实验室质量控制
国际标准侧重高通量体外模型验证,如酶活性单位定义;国家标准强调临床样本适用性,如细胞存活率阈值差异。

检测设备

1.高效液相色谱仪:Agilent1260InfinityII(检测限0.1μg/mL,流速范围0.1-5mL/min)

2.质谱仪:ThermoQExactiveHF-X(分辨率140000,质量精度≤1ppm)

3.荧光显微镜:OlympusIX83(物镜放大倍数40x,荧光通道≥4)

4.生物反应器:SartoriusBIOSTATRM(灌流速率0.1-10mL/min,温度控制±0.1°C)

5.氧电极系统:HansatechOxygraph(氧消耗分辨率0.1nmol,响应时间≤5s)

6.细胞培养箱:ThermoHeracell150i(CO₂控制精度±0.1%,湿度维持95%)

7.离心机:Eppendorf5810R(转速范围100-15000rpm,温度控制±1°C)

8.PCR仪:Bio-RadCFX96(温度均一性±0.1°C,扩增效率≥90%)

9.酶标仪:MolecularDevicesSpectraMaxM5(波长范围200-1000nm,精度±1%)

10.电生理系统:AxonMultiClamp700B(膜电位分辨率0.1mV,采样率10kHz)

11.冷冻切片机:LeicaCM1950(切片厚度1-50μm,温度控制-30°C)

12.同位素计数器:PerkinElmerTri-Carb4910TR(效率≥65%,本底计数≤50cpm)

13.细胞计数器:BeckmanCoulterVi-CellXR(计数精度±2%,活率检测误差≤1%)

14.恒温混匀仪:EppendorfThermoMixer(温度范围4-100°C,振荡速度300-3000rpm)

15.电化学工作站:CHI760E(电流分辨率1pA,电位范围±10V)

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

以上是与"心脏灌流心肌细胞脂肪酸氧化测试"相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。

    材料检测服务

    专业分析各类金属、非金属材料的成分、结构与性能,提供全面检测报告和解决方案。包括金属材料力学性能测试、高分子材料老化试验、复合材料界面分析等。

    化工产品分析

    精准检测各类化工产品的成分、纯度及物理化学性质,确保产品质量符合国家标准。服务涵盖有机溶剂分析、催化剂表征、高分子材料分子量测定等。

    环境检测服务

    提供土壤、水质、气体等环境检测服务,助力环境保护与污染治理,共建绿色家园。包括VOCs检测、重金属污染分析、水质生物毒性测试等。

    科研检测认证

    凭借专业团队和先进设备,致力于为企业研发、质量控制及市场准入提供精准可靠的技术支撑,助力品质提升与合规发展。