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概述:甲基化特异性PCR扩增验证是一种用于精确检测DNA甲基化状态的技术,核心检测对象为CpG岛甲基化水平。关键项目包括特异性引物扩增效率(如甲基化阳性率≥95%)、非甲基化抑制率(≤5%)、检测灵敏度(低至0.1%甲基化DNA)和重复性变异系数(CV≤10%)。该方法通过双引物系统区分甲基化和非甲基化序列,结合电泳或qPCR产物分析,确保扩增产物准确反映样本甲基化状态。验证过程涵盖阳性/阴性对照测试,以满足临床诊断或分子研究中的可靠性要求。
注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).
因篇幅原因,CMA/CNAS证书以及未列出的项目/样品,请咨询在线工程师。
特异性检测:
1.细胞培养DNA:涵盖HeLa、HEK293等细胞系,检测重点为培养过程甲基化漂移验证
2.组织切片DNA:包括福尔马林固定石蜡包埋样本,侧重DNA提取纯度与扩增抑制物清除
3.血液样本DNA:全血或血清来源,重点检测白细胞甲基化水平与溶血干扰排除
4.唾液样本DNA:口腔脱落细胞,关注细菌污染控制与低浓度DNA扩增
5.尿液样本DNA:泌尿系统细胞,检测重点为尿素抑制效应与甲基化位点稳定性
6.FFPE组织DNA:病理存档样本,侧重交联DNA修复与扩增效率优化
7.植物DNA:如拟南芥叶片,重点检测多糖杂质去除与甲基化模式验证
8.细菌DNA:研究用菌株,关注基因组甲基化同源性分析
9.法医样本DNA:微量或降解样本,检测重点为STR位点甲基化关联性
10.古DNA样本:考古来源,侧重脱氨基损伤校正与污染监控
国际标准:
1.热循环PCR仪:AppliedBiosystems9700型(温度范围4°C-99°C,精度±0.1°C)
2.实时荧光定量PCR仪:Bio-RadCFX96型(检测通道6个,灵敏度0.1拷贝)
3.电泳设备:ThermoFisherE-Gel系统(电压范围50-150V,分辨率≤10bp)
4.分光光度计:NanoDropOneC型(波长260/280nm,检测限0.2ng/μL)
5.离心机:Eppendorf5424R型(转速14,000rpm,温控4°C-40°C)
6.恒温器:GrantInstrumentsJB系列(温度稳定性±0.2°C,范围20°C-100°C)
7.凝胶成像系统:SyngeneGBox(CCD分辨率5MP,曝光时间1-60秒)
8.DNA提取仪:QIAGENQiacube(通量12样本,提取效率≥90%)
9.微量移液器:GilsonPipetmanL型(体积范围0.1-1000μL,精度±1%)
10.恒温水浴:MemmertWNB14(温度精度±0.1°C,容量14L)
11.生物分析仪:Agilent2100型(片段分析范围25-12,000bp,CV≤5%)
12.测序仪:IlluminaMiSeq(读长2x300bp,通量25Mreads)
13.温控设备:VWRScientific1260型(梯度温控±0.3°C,程序存储10个)
14.数据记录仪:OmegaEngineeringRDXL系列(采样率1Hz,存储容量2GB)
15.振荡器:IKAKS260型(转速50-1500rpm,振幅3mm)
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。
以上是与"甲基化特异性PCR扩增验证"相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。
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