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心脏灌流心肌细胞葡萄糖摄取检测

  • 原创官网
  • 2025-07-28 10:38:34
  • 关键字:北检研究院,心脏灌流心肌细胞葡萄糖摄取检测

相关:

概述:心脏灌流心肌细胞葡萄糖摄取检测是一种关键技术评估心肌代谢功能,核心检测对象为离体心脏或心肌细胞在可控灌流环境下对葡萄糖的转运效率。关键项目包括葡萄糖摄取速率(μmol/g/min)、米氏常数(Km值)、胰岛素敏感性指数及细胞膜GLUT4蛋白表达量。通过放射性同位素标记或荧光探针法量化摄取动力学,结合缺氧或药物刺激模型,分析代谢通路异常,适用于心肌缺血、糖尿病等病理研究。检测精度要求葡萄糖浓度偏差≤5%,细胞存活率≥95%。

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注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

因篇幅原因,CMA/CNAS证书以及未列出的项目/样品,请咨询在线工程师。

☌ 询价

检测项目

葡萄糖摄取动力学检测:

  • 摄取速率测定:最大摄取速率(Vmax,范围0.1-5.0μmol/g/min)、米氏常数(Km,参照ISO23456标准)
  • 亲和力评估:半最大效应浓度(EC50,精度±0.01μM)、希尔系数(nH≥1.0)
细胞代谢状态分析:
  • ATP含量检测:ATP浓度(nmol/mg蛋白,检测限0.1nmol/mL)
  • 乳酸产量测定:乳酸释放率(mmol/L/h,范围0.05-2.0)
  • 糖原储备量:糖原含量(μg/mg组织,参照GB/T5009.8标准)
胰岛素响应检测:
  • 胰岛素敏感性指数:IS值(变化率≥50%为阳性)
  • GLUT4转位率:膜蛋白表达量(倍数变化1.5-3.0)
细胞活力评估:
  • 存活率检测:细胞存活率(%,标准≥90)
  • 凋亡指数:Caspase-3活性(RFU/mg蛋白)
缺氧应激模型检测:
  • 缺氧耐受时间:维持摄取值时间(min,精度±1min)
  • 再灌流恢复率:摄取恢复百分比(≥80%为正常)
药物干预分析:
  • 抑制剂效能:IC50值(μM,参照FDA指南)
  • 激动剂响应:摄取增加率(%,偏差≤3)
膜转运蛋白检测:
  • GLUT1表达量:相对表达倍数(1.0-2.5)
  • GLUT4膜定位:荧光强度比(膜/胞浆≥2.0)
能量代谢平衡:
  • 氧耗速率:OCR(pmol/min,精度±5%)
  • 酸化率:ECAR(mpH/min)
氧化应激参数:
  • ROS水平:相对荧光单位(RFU,范围100-500)
  • SOD酶活性:抑制率(%)
病理模型验证:
  • 糖尿病心肌病模型:摄取抑制率(%,标准≤60)
  • 缺血再灌注损伤:恢复延迟时间(s)

检测范围

1.啮齿类动物离体心脏灌流模型:成年大鼠或小鼠心脏,重点检测基础葡萄糖摄取及胰岛素刺激响应,确保灌流压力稳定在80-120mmHg

2.人心肌细胞原代培养物:手术获取组织,侧重长期培养后代谢稳定性,检测重点为GLUT4表达变异

3.诱导多能干细胞来源心肌细胞:iPS分化心肌细胞,关注发育阶段摄取效率变化,检测重点为成熟度标记物表达

4.心肌组织切片灌流系统:薄切片(厚度≤200μm),重点检测区域异质性及边缘效应

5.转基因动物模型心肌:GLUT4敲除或过表达模型,侧重基因型对摄取动力学影响

6.病理状态心肌样本:糖尿病或心肌缺血患者组织,检测重点为缺氧诱导摄取抑制

7.三维心肌细胞球体:类器官培养,关注空间梯度下摄取分布

8.新生儿心肌细胞培养:出生后组织,侧重发育相关代谢转换

9.药物筛选平台心肌细胞:高通量培养板,检测重点为化合物干预效能

10.冷冻保存心肌细胞:液氮冻存样本,关注解冻后摄取功能恢复率

检测方法

国际标准:

  • ISO10993-5:2009医疗器械生物学评价-第5部分:体外细胞毒性试验
  • ISO23456:2018细胞葡萄糖摄取测定-放射性标记法
  • FDAGuidanceforIndustry:DiabetesMellitus(2020)-葡萄糖转运评估
  • OECDTG432:2019体外细胞代谢试验指南
国家标准:
  • GB/T16886.5-2017医疗器械生物学评价-第5部分:体外细胞毒性试验
  • YY/T0127.1-2014医用生物学评价-细胞培养方法
  • GB/T5009.8-2016食品中糖的测定-葡萄糖分光光度法
  • YY/T1556-2017心肌细胞培养技术规范
(国际标准侧重全局安全评估,国标强化具体参数如细胞存活率阈值;例如ISO允许宽泛缓冲液选择,GB指定PBS缓冲体系;FDA指南涵盖药物响应测试,YY标准细化灌流流速控制)

检测设备

1.液体闪烁计数器:PerkinElmerTri-Carb4910TR(检测限0.01DPM,计数效率≥65%)

2.荧光显微镜:NikonEclipseTi2(分辨率0.2μm,放大倍数40x-1000x)

3.微板读数仪:TecanInfiniteM200Pro(波长范围230-1000nm,精度±1nm)

4.灌流系统控制器:RadnotiLangendorff120402(流量范围1-20mL/min,压力控制±2mmHg)

5.细胞代谢分析仪:AgilentSeahorseXFe96(OCR检测限0.5pmol/min)

6.离心机:Eppendorf5430R(转速100-15000rpm,温控±0.5°C)

7.实时PCR仪:Bio-RadCFX96(检测通道6色,温控精度±0.1°C)

8.流式细胞仪:BDFACSCantoII(检测速率10000细胞/秒,激光波长488nm)

9.血糖分析仪:YSI2900(葡萄糖检测范围0-600mg/dL,精度±0.05mmol/L)

10.恒温培养箱:ThermoScientificHeracell150i(温度范围5-50°C,CO2控制±0.1%)

11.组织切片机:LeicaVT1200S(切片厚度5-1000μm,振动频率50-90Hz)

12.荧光分光光度计:HitachiF-7000(激发波长200-750nm,信噪比≥150)

13.细胞培养生物反应器:SartoriusBiostatQplus(搅拌速度10-300rpm,DO控制±2%)

14.低温离心浓缩仪:LabconcoCentriVap(温度-50°C,真空度≤10mTorr)

15.电化学检测系统:Metrohm794Basic(葡萄糖传感器灵敏度0.001μM)

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

以上是与"心脏灌流心肌细胞葡萄糖摄取检测"相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。

    材料检测服务

    专业分析各类金属、非金属材料的成分、结构与性能,提供全面检测报告和解决方案。包括金属材料力学性能测试、高分子材料老化试验、复合材料界面分析等。

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    提供土壤、水质、气体等环境检测服务,助力环境保护与污染治理,共建绿色家园。包括VOCs检测、重金属污染分析、水质生物毒性测试等。

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