隐球菌性脑膜炎检测

检测项目

病原学检测：

• 镜检分析：阳性率（≥80%）、隐球菌荚膜直径（5-20μm，参照CLSIM54）
• 培养鉴定：培养基类型（沙氏葡萄糖琼脂）、孵育温度（35-37°C）
• 菌落特征：生长时间（48-72h）、色素形成（奶油色至棕褐色）

抗原检测：

• 乳胶凝集试验：灵敏度（>95%）、特异性（>98%）
• 侧流免疫层析：检出限（0.5ng/mL）、线性范围（0.5-100ng/mL）
• 酶联免疫吸附：OD值阈值（≥0.8）、参照ISO15189

分子诊断：

• PCR扩增：靶标基因（JianCe区域）、CT值阈值（≤35）
• 实时荧光定量：灵敏度（99%）、特异性（100%）
• 基因测序：序列匹配度（≥98%）、参照CLSIMM18）

生化分析：

• 脑脊液葡萄糖：浓度值（≤2.2mmol/L）、参照WS/T459）
• 蛋白质测定：升高值（≥0.45g/L）、白蛋白比值（≥0.7）

细胞学检测：

• 白细胞计数：范围值（5-1000/μL）、淋巴细胞比例（≥70%）
• 隐球菌计数：定量标准（≥5CFU/mL）

血清学检测：

• 抗体筛查：IgG效价（≥1:80）、假阳性率（<5%）
• 抗原滴度：稀释终点（≥1:8）、参照ASTME3066）

药敏试验：

• 抗真菌敏感性：MIC值阈值（氟康唑≤8μg/mL）、参照CLSIM27
• 耐药性检测：变异基因（ERG11）、突变频率（≥10%）

影像关联检测：

• CT/MRI扫描：病灶直径（≥5mm）、水肿范围（≥2cm）
• 压力监测：颅内压值（≥25cmH2O）

并发症筛查：

• 炎症因子：IL-6水平（≥50pg/mL）、CRP升高值（≥10mg/L）
• 免疫指标：CD4计数（≤200/μL）、参照ISO15189）

质量控制：

• 样本稳定性：储存温度（2-8°C）、时效（≤24h）
• 重复性试验：CV值（≤5%）、偏差范围（±2%）

检测范围

1.脑脊液样本：腰椎穿刺获取，重点检测隐球菌抗原浓度、细胞计数及培养阳性率，用于急性期诊断

2.血液样本：血清或全血，侧重血清隐球菌抗原滴度筛查和分子诊断，辅助早期感染监测

3.组织活检样本：脑组织或淋巴结，关注病理切片隐球菌检出和免疫组化特异性，确诊局部病变

4.呼吸道样本：痰液或支气管灌洗液，重点培养鉴定和镜检，评估肺部原发感染源

5.尿液样本：晨尿或随机尿，检测抗原残留和细胞脱落，监控治疗疗效

6.脑脓肿样本：穿刺液或脓液，强化分子诊断和药敏试验，指导手术干预

7.免疫缺陷患者样本：HIV阳性或移植受体，侧重CD4计数关联检测和快速抗原筛查

8.儿童患者样本：婴幼儿脑脊液，关注低体积样本的敏感性和安全采集参数

9.治疗监测样本：系列脑脊液或血液，追踪抗原滴度变化和生化指标恢复

10.环境样本：土壤或鸽粪，检测隐球菌载量，溯源流行病学调查

检测方法

国际标准：

• CLSIM54隐球菌镜检和培养指南（墨汁染色阳性标准）
• CLSIM27抗真菌药敏试验方法（孵育温度37°C）
• ISO15189医学实验室质量要求（样本处理流程）
• ASTME3066免疫检测性能评估（灵敏度计算）
• EUCAST9.3真菌分子诊断标准（PCR扩增参数）

国家标准：

• WS/T459-2014真菌病实验室诊断指南（脑脊液葡萄糖阈值）
• GB/T37867-2019病原微生物核酸检测（CT值判定）
• YY/T1741-2021免疫层析试剂盒（检出限要求）
• GB4789.15-2016真菌培养计数（CFU/mL标准）
• WS233-2017脑脊液检验（白细胞计数范围）

方法差异说明：国际CLSIM27药敏试验使用RPMI培养基，而国家标准GB/T37867优先沙氏培养基；分子诊断ISO15189要求温度控制±0.5°C，国标YY/T1741允许±1°C；影像关联检测国际标准侧重定量病灶，国标WS233强调定性描述

检测设备

1.显微镜：奥林巴斯CX43（放大倍数40-1000x，分辨率0.2μm）

2.PCR仪：AppliedBiosystems7500（热循环温度范围4-99°C，精度±0.1°C）

3.酶标仪：BioTekSynergyH1（波长范围200-1000nm，检测限0.001OD）

4.离心机：Eppendorf5430R（转速100-15000rpm，容量24×1.5mL）

5.培养箱：MemmertIN260（温度范围5-70°C，稳定性±0.3°C）

6.免疫分析仪：SiemensADVIACentaur（检测通量200测试/小时，灵敏度0.1ng/mL）

7.电泳系统：Bio-RadMini-PROTEAN（电压10-300V，凝胶浓度1-5%）

8.自动化血细胞仪：SysmexXN-1000（白细胞计数范围0-100×10³/μL，精度±2%）

9.生物安全柜：EscoAirstream（气流速度0.4m/s，HEPA过滤效率99.99%）

10.压力监测仪：RaumedicNeurovent-P（量程0-100mmHg，分辨率0.1mmHg）

11.分光光度计：ShimadzuUV-1900i（波长190-1100nm，带宽1nm）

12.冷冻储存箱：ThermoScientificTSX（温度-86°C，容积700L）

13.核酸提取仪：QIACube（提取效率≥95%，样本容量12）

14.流式细胞仪：BDFACSCantoII（检测通道10，流速12μL/min）

15.超声破碎仪：SONICSVCX800（功率50-800W，频率20kHz）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"隐球菌性脑膜炎检测"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。