心脏灌流钙离子转运检测

检测项目

钙离子通道活性检测：

• L型钙通道电流（ICa-L/pA，参照ISO15198）
• T型钙通道开放概率（Po，±0.05）

肌浆网钙泵功能检测：

• 钙泵ATP酶活性（nmolPi/mg·min）
• 钙摄取速率（μmolCa²⁺/g·wetweight·min）

线粒体钙摄取能力检测：

• 线粒体钙摄取速率（nmolCa²⁺/mgprotein·min）
• 钙摄取饱和容量（μmolCa²⁺/gprotein）

胞浆钙瞬变动力学检测：

• 钙瞬变峰值（F/F0，±0.02）
• 衰减时间常数（τ/ms，参照ASTMF2997）
• 上升速率（dF/dtmax，±0.01F/s）

钙调蛋白结合活性检测：

• 钙调蛋白-钙复合物形成率（%，±1.0）
• 结合解离常数（KD/μmol/L）

钠钙交换体功能检测：

• 反向转运电流（INCX/pA）
• 钠离子依赖性钙释放速率（nmolCa²⁺/mgprotein·min）

钙火花事件分析：

• 钙火花频率（次/秒·细胞）
• 火花振幅（ΔF/F0，±0.03）
• 火花半宽（μm，±0.1）

钙振荡频率检测：

• 振荡周期（s，±0.1）
• 峰值间隔变异系数（CV%，≤10）

钙超载阈值测定：

• 钙超载触发浓度（μmol/L，±0.05）
• 超载后细胞存活率（%，≥85）

钙信号空间分布检测：

• 钙信号传导速度（μm/s）
• 区域异质性指数（HI，±0.01）

检测范围

1.离体心脏组织：涵盖大鼠、小鼠、家兔等实验动物心脏，重点检测整体钙转运效率与灌注压力相关性

2.心肌细胞悬液：分离自成年哺乳动物心室肌细胞，侧重单细胞钙瞬变异质性分析

3.心肌细胞器（肌浆网/线粒体）：从心肌组织中提取的高纯度细胞器样本，重点检测钙摄取释放功能

4.转基因动物心脏样本：携带钙通道或钙泵基因修饰的动物心脏，用于研究基因对钙转运的影响

5.药物干预后的心肌组织：经钙通道阻滞剂、强心药物处理的心脏，检测药物对钙稳态的调节作用

6.缺血再灌注损伤心脏：模拟心肌梗死再灌注过程的心脏样本，重点分析钙超载程度及线粒体功能损伤

7.心肌病模型心脏（如肥厚型/扩张型）：病理模型心脏，检测钙转运异常与心肌重构的关系

8.胚胎心肌组织：胚胎或新生动物心脏，研究发育过程中钙转运系统的成熟规律

9.干细胞来源心肌细胞：诱导多能干细胞（iPSC）分化的心肌细胞，评估其钙转运功能的成熟度

10.心衰患者心肌活检样本：终末期心衰患者的心肌组织，揭示临床病理状态下钙稳态失衡的机制

检测方法

国际标准：

• ISO15198:2021心血管系统药物安全性评价离体心脏灌流试验
• ASTMF2997-13(2019)心肌细胞钙信号检测指南
• ISO20186-1:2019生物技术细胞培养钙成像检测方法

国家标准：

• GB/T38477-2020离体心脏灌流系统技术要求
• YY/T1516-2017心肌细胞钙瞬变检测方法
• GB/T29753-2013动物细胞培养钙浓度测定

ISO15198强调灌流液中钙离子浓度的稳定性（±0.1mmol/L），ASTMF2997则注重荧光探针的加载时间（30-60min）；GB/T38477规定了灌流系统的压力控制精度（±1mmHg），YY/T1516对钙瞬变的采样频率（≥100Hz）有明确要求。

检测设备

1.离体心脏灌流系统：HarvardApparatus68000（灌注压力范围0-150mmHg，恒温精度±0.5℃）

2.膜片钳系统：Axopatch200B（电流检测范围±20pA至±20nA，增益1000x）

3.荧光钙成像系统：OlympusFV3000（多光子激发效率≥80%，帧速率≥30fps）

4.激光共聚焦显微镜：ZeissLSM880（分辨率120nm，扫描速度512x512像素/秒）

5.肌浆网钙泵活性测定仪：Bio-RadChemiDocXRS+（检测限0.1nmolPi，线性范围0-100nmol）

6.线粒体钙摄取检测系统：ThermoScientificVarioskanLUX（荧光检测灵敏度≥0.01荧光单位，温度控制±0.1℃）

7.离子色谱仪：DionexICS-5000+（检测限≤0.1ppb，柱温稳定性±0.1℃）

8.高速离心机：BeckmanCoulterOptimaXPN-100（最大转速100000rpm，最大相对离心力800000xg）

9.恒温震荡培养箱：ThermoScientificForma430（温度范围4-60℃，震荡频率50-300rpm）

10.流式细胞仪：BDFACSAriaIII（荧光通道数8个，分选速度10000细胞/秒）

11.多通道生理信号记录仪：PowerLab16/35（采样率≥10kHz，通道数16）

12.荧光分光光度计：PerkinElmerLS55（激发波长范围200-800nm，发射波长范围200-900nm）

13.微量移液器：EppendorfResearchPlus（容量范围0.1-1000μL，精度±0.5%）

14.超低温冰箱：ThermoScientificRevcoUxF（温度范围-86℃至-40℃，温度稳定性±1℃）

15.生物安全柜：Labconco3950（洁净等级ISO5，气流速度0.53m/s）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"心脏灌流钙离子转运检测"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。