发酵车间洁净区微生物检测

检测项目

空气微生物检测：

• 浮游菌计数：CFU/m³（参照GB/T16293-2010）、采样效率（≥95%）
• 沉降菌计数：CFU/皿（φ90mm培养皿，参照ISO14698-1:2003）、培养时间（48±2小时）
• 空气尘粒数：≥0.5μm粒子浓度（CFU/m³）、≥5μm粒子浓度（CFU/m³，参照GB/T16292-2010）

表面微生物检测：

• 设备表面擦拭试验：CFU/cm²（参照USP<61>）、采样面积（100cm²）
• 墙面/地面涂抹试验：CFU/100cm²、中和剂有效性验证（≥99%）
• 包装材料表面微生物：CFU/件（参照GB4789.2-2016）、样品量（≥10件/批次）

人员卫生检测：

• 手表面微生物：CFU/只手（参照GB15979-2002）、ATP荧光检测（≤10RLU）
• 工作服表面微生物：CFU/100cm²（参照ISO14698-2:2003）、采样部位（胸前、袖口）
• 帽檐/口罩微生物：CFU/件、培养温度（36±1℃）

原料与辅料检测：

• 原料微生物限度：总需氧菌计数（≤1000CFU/g，参照GB4789.2-2016）、霉菌酵母菌计数（≤100CFU/g）
• 辅料致病菌筛查：沙门氏菌（不得检出/25g，参照GB4789.4-2016）、金黄色葡萄球菌（不得检出/25g，参照GB4789.10-2016）
• 原料水分含量：≤15%（与微生物生长相关性检测）

生产用水检测：

• 纯化水微生物限度：≤100CFU/mL（参照USP<62>）、细菌内毒素（≤0.25EU/mL，参照GB/T14233.2-2005）
• 注射用水：无菌检查（不得检出微生物，参照中国药典2020版四部）、电导率（≤1.3μS/cm，25℃）
• 工艺用水：总大肠菌群（≤1000MPN/L，参照GB8978-1996）、耐热大肠菌群（不得检出）

压缩空气检测：

• 压缩空气微生物：CFU/m³（参照ISO8573-7:2010）、采样流量（100L/min）
• 压缩空气油分含量：≤0.1mg/m³（参照ISO8573-6:2016）、检测方法（红外光谱法）
• 压缩空气水分含量：≤-40℃露点（参照ISO8573-3:2019）、检测仪器（露点仪）

洁净服清洗效果检测：

• 洁净服微生物残留：CFU/100cm²（参照GB/T24249-2009）、采样部位（腋下、背部）
• 洁净服颗粒脱落：≥0.5μm粒子数/件（≤10000个/件，参照ISO14644-1:2015）、检测仪器（激光粒子计数器）
• 洁净服表面沾污度：灰分含量（≤0.01%，参照GB/T12027-2004）、检测方法（灼烧法）

消毒剂效果验证：

• 消毒剂杀菌率：≥99.9%（参照GB27952-2011）、试验菌株（金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌）
• 消毒剂残留量：≤0.01mg/cm²（参照GB/T38502-2020）、检测方法（高效液相色谱法）
• 消毒剂有效期：有效期内微生物增殖（不得检出，参照GB/T26367-2020）、储存条件（25℃以下避光）

发酵罐内环境检测：

• 发酵罐内壁微生物：CFU/cm²（参照GB/T16294-2010）、采样工具（无菌曲面采样器）
• 发酵罐顶空空气微生物：CFU/m³（A级区≤1CFU/m³，参照ISO14644-1:2015）、采样方法（安德森采样器）
• 发酵罐进料口微生物：CFU/100cm²（≤10CFU/100cm²，参照GMP2010版）、检测频率（每批次进料前）

废弃物排放检测：

• 车间排放废水：总大肠菌群（≤1000MPN/L，参照GB8978-1996）、COD（≤500mg/L）
• 排放废气：微生物（CFU/m³，≤1000CFU/m³，参照GB16297-1996）、检测方法（滤膜法）
• 废弃物包装：表面微生物（CFU/件，≤100CFU/件，参照GB/T23786-2009）、包装材料（可降解塑料）

检测范围

1.食品发酵车间：涵盖酸奶、面包、酒类、酱油、醋等发酵区域，重点检测原料预处理区、发酵罐周边及成品包装区的空气微生物与人员手卫生

2.制药发酵车间：包括抗生素（如青霉素、头孢菌素）、疫苗（如新冠疫苗）、生物制品（如干扰素）发酵区域，侧重无菌操作区（A级/B级）的浮游菌、沉降菌及压缩空气微生物监控

3.饲料发酵车间：涉及青贮饲料、微生物饲料（如益生菌饲料）、发酵豆粕等区域，重点检测发酵原料（如玉米、豆粕）与成品包装表面的微生物负载

4.工业酶发酵车间：涵盖淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶等发酵区域，侧重发酵罐内壁、压缩空气及原料（如小麦粉、玉米淀粉）的微生物检测

5.化妆品发酵车间：包括面膜（如酵母发酵面膜）、护肤品（如发酵精华液）等区域，重点检测人员卫生（手、工作服）与原料（如玻尿酸、发酵提取物）的微生物限度

6.生物燃料发酵车间：涉及乙醇（燃料乙醇）、沼气（生物沼气）等发酵区域，重点检测发酵废水（如糖化废水、发酵醪液）与废气（如沼气燃烧废气）的微生物排放

7.益生菌发酵车间：涵盖乳酸菌（如Lactobacillus）、双歧杆菌（如Bifidobacterium）等发酵区域，侧重无菌灌装区（A级）的浮游菌、沉降菌及成品（益生菌粉）的微生物纯度

8.调味品发酵车间：包括酱油（大豆发酵）、醋（米醋、陈醋）、豆瓣酱等区域，重点检测发酵池表面（如酱油池、醋缸）与人员手卫生的微生物

9.基因工程发酵车间：涉及重组蛋白（如胰岛素）、抗体（如单抗药物）等发酵区域，侧重基因工程菌（如大肠杆菌、CHO细胞）的泄漏监控与环境微生物（如杂菌污染）检测

10.农业微生物发酵车间：包括生物农药（如苏云金杆菌）、生物肥料（如根瘤菌肥）等区域，重点检测发酵原料（如甘蔗渣、稻壳）与成品（如菌剂颗粒）的微生物负载

检测方法

国际标准：

• ISO14698-1:2003洁净室及相关控制环境—微生物污染控制—第1部分：总则（规定了洁净室微生物检测的基本原则与采样方法，适用于空气、表面微生物的定性与定量检测）
• ISO8573-7:2010压缩空气—第7部分：微生物污染物的试验方法（针对压缩空气中微生物的采样与计数方法，强调采样效率与培养条件的一致性）
• USP<61>微生物限度试验（美国药典标准，用于非无菌产品的微生物计数，包括总需氧菌、霉菌酵母菌的测定，规定了样品制备（如稀释、中和）与培养条件（如温度、时间））
• ASTME1153-19洁净室空气中浮游菌的计数方法（采用安德森采样器，注重采样流量（28.3L/min）与采样时间（通常10分钟）的标准化）

国家标准：

• GB/T16293-2010医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法（与ISO14698-1相比，增加了中国药典对医药洁净室的特殊要求，如A级区浮游菌采样频率）
• GB/T16292-2010医药工业洁净室（区）空气尘粒的测试方法（采用激光粒子计数器，规定了不同洁净级别的粒子浓度限值，与ISO14644-1要求一致）
• GB15979-2002一次性使用卫生用品卫生标准（用于人员手卫生检测，采用ATP荧光法，检测限≤10RLU，强调日常监测的便捷性）
• GB4789.2-2016食品微生物学检验菌落总数测定（与ISO4833-1相比，培养温度（36±1℃）与时间（48±2小时）更符合中国食品行业习惯，适用于食品发酵车间的原料与成品微生物计数）

（方法差异说明：国际标准（如ISO14698-1）更注重方法的通用性，适用于全球范围内的洁净室检测；国家标准（如GB/T16293）则结合中国医药、食品行业的具体要求，增加了针对无菌药品生产的特殊条款（如A级区的采样频率）。USP<61>主要用于制药行业的微生物限度试验，而GB4789.2更适用于食品行业的菌落总数测定，两者在样品稀释倍数（USP<61>通常采用1:10稀释，GB4789.2采用1:10、1:100、1:1000稀释）与培养条件（USP<61>采用30-35℃培养48-72小时，GB4789.2采用36±1℃培养48±2小时）上存在差异。）

检测设备

1.浮游菌采样器：TSI9310型（采样流量28.3L/min，计数范围1-1000CFU/次，采用安德森六级采样头，符合ISO14698-1与GB/T16293标准）

2.沉降菌培养皿：直径90mm聚苯乙烯培养皿（含胰酪大豆胨琼脂，培养面积55cm²，灭菌方式（高压蒸汽灭菌121℃，20分钟），符合ISO14698-1与GB/T16294标准）

3.表面微生物擦拭棒：3M6406型（含中和剂（如卵磷脂、吐温80）的无菌擦拭棒，采样面积100cm²，适用于设备表面、墙面、人员手等部位的微生物采样，符合USP<61>与GB15979标准）

4.激光粒子计数器：MetOne3413型（检测范围0.3-10μm，流量28.3L/min，精度±10%，可存储1000组数据，符合ISO14644-1与GB/T16292标准）

5.微生物培养箱：ThermoScientificHeracell150i型（温度范围15-50℃，波动度±0.5℃，湿度控制30-90%RH，具有双重门设计，符合ISO14698-1与GB4789.2标准）

6.压缩空气微生物采样器：PMSA201型（采样流量100L/min，采样时间可设置（1-60分钟），适用于ISO8573-7标准的压缩空气微生物检测，可连接压缩空气管道）

7.手卫生微生物监测系统：HygienaSystemSUREPlus型（ATP荧光检测，检测限≤10RLU，检测时间≤10秒，适用于人员手、工作服的快速微生物监测，符合GB15979与USP<61>标准）

8.洁净服颗粒计数器：RionKL-11型（检测范围0.5-10μm，流量50L/min，可移动采样（重量≤5kg），适用于洁净服颗粒脱落的检测，符合ISO14644-1与GB/T24249标准）

9.消毒剂残留检测仪：X-Rite528型（分光光度法，检测范围0.01-10mg/cm²，可检测常见消毒剂（如乙醇、次氯酸钠、季铵盐）的残留，符合GB/T38502与GB27952标准）

10.发酵罐内壁采样器：SamplingSystems1234型（无菌操作（采用一次性无菌采样头），采样面积50cm²，适用于曲面（如发酵罐内壁）的微生物采样，符合GB/T16294与GMP2010版标准）

11.废水微生物检测仪：HachHQ40d型（总大肠菌群快速检测，检测时间≤24小时，采用免疫荧光法，检测限≤1MPN/L，符合GB8978与GB4789.3标准）

12.基因工程菌检测仪：AppliedBiosystems7500型（PCR法，检测限≤1CFU/mL，可检测常见基因工程菌（如大肠杆菌DH5α、CHO细胞），符合GB/T38477与ISO22118标准）

13.洁净室环境监测系统：EmersonRXi-200型（实时监控参数：温度（0-50℃）、湿度（10-90%RH）、粒子数（0.5μm/5μm）、浮游菌（CFU/m³），数据存储≥1年，可连接企业ERP系统，符合ISO14644-2与GB/T25915标准）

14.无菌培养箱：ESCOCelCulture150型（A级无菌环境（≥0.5μm粒子浓度≤3520个/m³），采用高效过滤器（HEPA，效率≥99.99%），适用于无菌产品（如疫苗、生物制品）的微生物检验，符合USP<71>与中国药典2020版标准）

15.微生物鉴定系统：VITEK2Compact型（自动化鉴定，涵盖1500种微生物（包括细菌、真菌、酵母），鉴定时间≤6小时，采用荧光底物法与比色法，符合ISO6579与GB4789.4标准）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

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