帕金森病(PD)动物模型Animal model of Parkinson's disease

6-OHDA诱导大鼠PD模型

　　品系：SD大鼠。

　　6-OHDA是特异性的儿茶酚胺能神经毒素。目前6-OHDA神经毒素作用的确切机制并未完全明了，已有研究表明6-OHDA的机制与氧化应激和抑制线粒体呼吸链有关。6-OHDA可与DA转运体结合进入黑质纹状体DA能神经元，经过多重氧化，最终损伤细胞。6-OHDA还可通过抑制线粒体呼吸酶复合体，阻断电子传递链，增加氧化应激，导致线粒体呼吸链被抑制，最终细胞内ATP耗尽引起细胞死亡。

　　由于6-OHDA不能穿过血脑屏障，因此只能采用立体定位注射的方法诱导模型。由于可以采取单侧注射和双侧注射的方式，因此6-OHDA模型分为单侧与双侧模型，而其中单侧造模可以提高动物耐受力，并可以将正常侧作为内部控制组，与病变侧(造模侧)进行对照研究，更好地区分正常与异常运动区并评估损伤引起的运动缺陷，因此单侧模型是目前最常用和经典的模型。

　　根据不同的脑立体定位注射位点，6-OHDA也表现出不同的特性，其中较为主流的三种注射位点是黑质致密部(SNc)、纹状体(CS)、前脑内侧束(MBF)。其中MBF多点注射是获得显著可再生的多巴胺能变性模型的有效方法，即使在很长的生存时间内，动物也几乎没有自发补偿的倾向。6-OHDA模型的优势主要表现在评估方法上，通过一侧损毁，引用阿朴吗啡(或苯丙胺)不自主的向健侧(或伤侧)旋转运动行为可评估药物对黑质DN的保护作用。损伤程度则根据出现对侧行为症状来评断模型成功与否。但其劣势为病死率较高，表现为急性模型，且不能很好地模拟出PD常见的全身临床症状如静止性震颤、运动功能减弱、肌肉僵直及四肢拘挛等。此外该模型也不能表现出帕金森病的一大基本病埋特征：路易小体(LB)的聚集。尽管如此，单侧6-OHDA模型仍是目前PD药物临床前研究的应用最多的模型之一。

MPTP诱导小鼠PD模型

　　品系：C57BL/6小鼠。

　　MPTP作为高亲脂性化合物，能有效地透过血-脑脊液屏障。在脑内，先是被细胞线粒体外膜的单胺氧化酶B催化变成中间代谢产物MPDP+,后自发氧化成毒性的MPP+。MPP+的结构与DA类似，能够与多巴胺能转运体(DAT)高度亲和，

　　被纹状体内多巴胺能(DAG)神经元轴突末梢突触前膜的DAT运载进入胞体内。大鼠对MPP+毒性具有抗性，在给药后其多巴胺能神经元可以存活，因此本模型一股选择小鼠。各种PD小鼠模型根据注射剂量、间隔时间、方式以及时间长短的不同来制备不同研究目的模型，主要分为急性模型、亚急性模型和慢性模型。

　　急性模型是采用腹腔或皮下注射，间隔时间短，建模速度快，损伤严重，但其模型并不符合PD慢性发病的特点，并且这种建模方法并非神经元慢性凋亡而是快速损伤坏死，病死率相对较高。

　　亚急性模型同样也采用腹腔注射或皮下注射的方式，间隔时间较急性长，建模速度一般，成活率较高，损伤比急性轻，并且具有PD一定的发病特点，DAG神经元有部分凋亡。

　　亚急性模型的缺点是损伤时间比急性模型长，病理机制与PD患者慢性发病机制差别比较大，其损伤的DAG神经元有部分凋亡的同时还有大量坏死。经目前研究表明，不管是急性还是亚急性，都只是一个短暂的对于黑质-纹状体神经元容易发生逆转的神经毒性作用，这种快速的方法无法与缓慢、渐进性的PD相匹配。慢性模型除了给药时间间隔长，其病死率非常低，症状典型稳定，且病理损伤过程稳固不易恢复，与PD的病理生理过程相符合。但与6-OHDA模型类似，本模型也很难形成路易小体(LB)的聚集。尽管如此，本模型依然是目前PD全身症状研究的品系：C57BL/6小鼠。MPTP作为高亲脂性化合物，能有效地透过血-脑脊液屏障。在脑内，先是被细胞线粒体外膜的单胺氧化酶B催化变成中间代谢产物MPDP+,后自发氧化成毒性的MPP+。MPP+的结构与DA类似，能够与多巴胺能转运体(DAT)高度亲和，被纹状体内多巴胺能(DAG)神经元轴突末梢突触前膜的DAT运载进入胞体内。大鼠对MPP+毒性具有抗性，在给药后其多巴胺能神经元可以存活，因此本模型一股选择小鼠。各种PD小鼠模型根据注射剂量、间隔时间、方式以及时间长短的不同来制备不同研究目的模型，主要分为急性模型、亚急性模型和慢性模型。急性模型是采用腹腔或皮下注射，间隔时间短，建模速度快，损伤严重，但其模型并不符合PD慢性发病的特点，并且这种建模方法并非神经元慢性凋亡而是快速损伤坏死，病死率相对较高。

　　亚急性模型同样也采用腹腔注射或皮下注射的方式，间隔时间较急性长，建模速度一般，成活率较高，损伤比急性轻，并且具有PD一定的发病特点，DAG神经元有部分凋亡。亚急性模型的缺点是损伤时间比急性模型长，病理机制与PD患者慢性发病机制差别比较大，其损伤的DAG神经元有部分凋亡的同时还有大量坏死。经目前研究表明，不管是急性还是亚急性，都只是一个短暂的对于黑质-纹状体神经元容易发生逆转的神经毒性作用，这种快速的方法无法与缓慢、渐进性的PD相匹配。慢性模型除了给药时间间隔长，其病死率非常低，症状典型稳定，且病理损伤过程稳固不易恢复，与PD的病理生理过程相符合。但与6-OHDA模型类似，本模型也很难形成路易小体(LB)的聚集。尽管如此，本模型依然是目前PD全身症状研究最多的模型之一。模型之一。

鱼藤酮诱导 大鼠PD模型

　　品系：SD大鼠。

　　鱼藤酮PD大鼠动物模型**的优势为PD模型行为学改变和病理学特征均与临床PD相似。鱼藤酮模型给药方式较多，优劣各异。脑立体定位给药的造模方法较难，需定位准确，但其病死率低，成功率高。静脉给药方式的存活率相对其他大剂量的存活率高，方法简单，药物直接进入全身循环，但全身毒性大。腹腔注射造模，吸收面积大，成模率高，操作简便，不仅症状与人类PD相似，且能制备PD的胃肠功能障碍模型。皮下注射的方式更为便捷，成本低，成模率高，但皮下注射会引起大鼠全身毒性，导致较高病死率，且不符合PD病变特点。口服造模符合PD慢性进行性病程，还避免了外周毒性，该方式病死率低，成模率高，适于研究PD病机病程变化及治疗药物的作用机制。与MPTP模型相比，鱼藤酮模型是研究PD病理中路易小体形成的理想模型。但是鱼藤酮存在半衰期短、降解快的特点。随着时间的推移，鱼藤酮模型自愈性越来越明显，因此不能很好地模拟出人类PD的慢性进程。此外，高剂量鱼藤酮造模时，动物受全身毒性作用的影响容易出现与PD无关的表现，例如心血管毒性和非特异性脑损伤。

A53T小鼠自发PD模型

　　品系：A53T小鼠。

　　背景：C57BLU6小鼠。

　　SNCA是第一个被发现与PD相关的常染色体显性基因，其编码的a-synuclein?蛋白是一种存在于中枢神经系统神经突触末端的可溶性蛋白，是路易小体(LB)的重要组成部分。在家族遗传性PD中存在三种突变(A53T、A3OP、E46K)和其野生型二倍体表达，SNCA点突变或者二倍体都会导致a-synuclein蛋白聚集成路易小体(LB),阻碍多巴胺的代谢和神经元的正常功能，导致神经元死亡。Prnp-SNCA*A53T转基因小鼠可表达突变的人A53Ta-synuclein蛋白。在8月龄时，纯合子小鼠可出现严重运动表型，表现为体重减轻，颤抖、无法直立、肢体部分瘫痪和行动不便，8-12月龄小鼠的脊髓、脑干、小脑、丘脑中密集堆积a-synuclein蛋白包涵体，且这些包涵体与人类家族性PD病理特征相似。因此本模型一般用于家族性PD的研究。

　　以上是与帕金森病(PD)动物模型相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。