检测项目
药物敏感性检测:
- IC50测定:半数抑制浓度(μM)、Hill斜率(参照ISO10993-5)
- EC50测定:半数有效浓度(μM)、置信区间(95%CI)
- 剂量-响应曲线:曲线下面积(AUC)、斜率参数
- MTT检测:细胞存活率(%)、吸光度差值(≥0.3OD)
- Calcein-AM染色:活细胞比率(%)、荧光强度阈值
- 乳酸脱氢酶释放:LDH释放量(U/L)、参照ASTMF895)
- BrdU掺入:增殖抑制率(%)、S期细胞百分比
- Ki67免疫染色:阳性细胞比例(%)、核染色强度
- 细胞周期分析:G0/G1期比率、S期持续时间
- AnnexinV/PI染色:早期凋亡率(%)、晚期凋亡率(%)
- Caspase-3活性:荧光强度单位、活化倍数变化
- TUNEL检测:DNA断裂细胞数、阳性核计数
- 划痕试验:愈合率(%)、迁移距离(μm)
- Transwell迁移:迁移细胞数、侵入指数
- Boyden小室:滤膜穿透率(%)、参照GB/T16886)
- qRT-PCR:靶基因表达倍数变化、Ct值差异
- RNA-Seq:差异表达基因数、FPKM阈值
- 甲基化检测:甲基化位点比例(%)、CpG岛覆盖率
- WesternBlot:蛋白相对表达量、灰度值比率
- 免疫组化:染色强度评分(0-3级)、阳性区域占比
- ELISA:细胞因子浓度(pg/mL)、检测限(0.1pg/mL)
- 3D成像:类器官体积变化率(%)、表面积缩减
- H&E染色:组织结构完整性评分(1-5级)
- 共聚焦显微镜:细胞层厚度(μm)、核质比
- ATP检测:ATP水平(相对荧光单位)、衰减率
- 葡萄糖消耗:浓度变化(mM)、消耗速率
- 氧消耗率:OCR值(pmol/min)、基础呼吸率
- 慢性暴露:IC50变化(fold)、耐药指数
- 恢复能力试验:细胞恢复率(%)、时间参数(天)
- 基因突变检测:突变频率(/10^6细胞)、SNP数量
检测范围
1.肝类器官:药物肝代谢评估,检测重点为CYP酶活性和胆汁酸积累毒性。
2.肺类器官:吸入药物敏感性测试,侧重肺泡功能损伤和炎症因子释放。
3.肠类器官:口服药物吸收效率评估,检测重点为肠屏障完整性和黏液分泌变化。
4.脑类器官:神经毒性药物评估,聚焦神经递质水平和神经元存活率。
5.心脏类器官:心脏药物敏感性测试,检测重点为收缩力变化和心律失常风险。
6.肿瘤类器官:抗癌药物响应评估,侧重肿瘤细胞凋亡率和耐药机制。
7.胰腺类器官:糖尿病药物测试,检测重点为胰岛素分泌功能和β细胞存活。
8.肾类器官:肾毒性药物评估,聚焦肾小球滤过率和管状损伤指标。
9.皮肤类器官:外用药物渗透性测试,检测重点为表皮屏障功能和刺激性反应。
10.血管类器官:抗血管生成药物评估,侧重内皮细胞迁移抑制和管腔形成变化。
检测方法
国际标准:
- ISO10993-5:体外细胞毒性试验方法
- ISO14698:生物污染控制规程
- ASTME2524:细胞增殖测定标准
- GB/T16886:医疗器械生物学评价
- GB/T33234:药物敏感性测试指南
- GB/Z42344:类器官培养技术规范
检测设备
1.高内涵成像系统:PerkinElmerOperaPhenix(分辨率0.5μm)
2.流式细胞仪:BDFACSCantoII(荧光通道8通道)
3.倒置荧光显微镜:OlympusIX83(物镜放大倍数40x)
4.酶标仪:BioTekSynergyH1(波长范围200-999nm)
5.实时荧光定量PCR仪:RocheLightCycler480(检测速度5s/cycle)
6.CO2培养箱:ThermoScientificHeracell150i(温度精度±0.1°C)
7.台式离心机:EppendorfCentrifuge5424R(最大转速15000rpm)
8.自动化液体处理站:TecanFreedomEVO150(精度±1μL)
9.分光光度计:NanodropOne(样品量1μL)
10.微孔板读取器:MolecularDevicesSpectraMaxi3x(检测模式双波长)
11.冷冻切片机:LeicaCM1950(切片厚度5-50μm)
12.生物安全柜:ESCOClassIIA2(气流速度0.4m/s)
13.细胞培养皿:CorningCostar(直径35mm)
14.实时细胞分析仪:ACEAxCELLigenceRTCA(电极阻抗检测)
15.原子力显微镜:BrukerDimensionIcon(分辨率纳米级)