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DREB转录因子表达量测试

  • 原创官网
  • 2025-07-31 14:28:15
  • 关键字:北检研究院,DREB转录因子表达量测试

相关:

概述:DREB转录因子表达量测试聚焦于植物干旱响应元件结合蛋白的定量分析,核心检测对象包括基因转录水平、蛋白表达丰度及功能活性验证。关键项目涉及实时荧光定量PCR测定循环阈值(Ct值)、Western blot蛋白灰度分析、ELISA光密度值(OD值)测定、DNA结合迁移率变化等参数,评估胁迫条件下表达动态与调控机制,为抗逆性研究提供分子基础。

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注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

因篇幅原因,CMA/CNAS证书以及未列出的项目/样品,请咨询在线工程师。

☌ 询价

检测项目

基因表达定量检测:

  • mRNA相对表达量:Ct值(2^-ΔΔCt法,参照ISO20166-4)、扩增效率(90-110%)
  • 转录稳定性:半衰期(h)、降解率(%/h)
蛋白表达水平检测:
  • Westernblot丰度:灰度值(AU,参照GB/T28022)、条带强度比
  • ELISA定量:OD450值(检测限0.1ng/mL)、标准曲线R²≥0.99
胁迫响应分析:
  • 干旱处理表达变化:峰值时间点(h)、表达增幅(倍)
  • 盐胁迫响应:斜率(表达变化率/h)、阈值浓度(mM)
亚细胞定位验证:
  • 荧光显微镜观察:定位系数(核质比≥1.5)、共定位率(%)
  • 共聚焦成像:Z-stack分辨率(μm)、信噪比(dB)
DNA结合活性测试:
  • EMSA实验:迁移率变化(%)、结合常数(Kd)
  • ChIP-qPCR:富集度(foldchange)、峰面积(AU)
转基因功能验证:
  • 过表达株系筛选:表达倍数(≥2倍)、插入拷贝数
  • 敲除效率评估:缺失率(%)、表型一致性
转录调控机制:
  • 启动子活性:荧光素酶值(RLU)、诱导倍数
  • 下游基因表达:相关性系数(r≥0.8)、调控网络
生理指标关联测试:
  • 脯氨酸含量:μg/gFW、胁迫响应阈值
  • MDA水平:nmol/gFW、氧化损伤指数
统计处理:
  • 表达量变异系数:SD(≤0.15)、ANOVA分析(p<0.05)
  • 数据归一化:内参基因稳定性(M值<1)
质量控制参数:
  • RNA完整性:RIN值(≥7.0)、A260/A280(1.8-2.0)
  • 样本回收率:90-110%、空白对照值(OD<0.05)

检测范围

1.叶片组织:新鲜植物叶片样本,重点检测光合胁迫下DREB转录因子的早期表达峰值动态变化。

2.根组织:根尖分生组织样本,侧重水分胁迫响应中的表达调控机制与根系发育关联。

3.种子:萌发期种子样本,检测干旱耐受性评估中的表达水平与发芽率相关性。

4.愈伤组织:体外培养愈伤组织,分析基因工程操作后DREB表达稳定性及再生能力影响。

5.转基因水稻株系:过表达或敲除株系,验证功能表型与表达量一致性。

6.拟南芥模型:野生型与突变体样本,研究基础分子机制中的表达时空特异性。

7.玉米植株:经济作物植株,侧重抗旱育种中DREB表达与产量性状关联。

8.果实组织:发育阶段果实样本,检测成熟过程中表达动态与胁迫响应交互作用。

9.藻类样本:模式藻类生物,分析简单系统下胁迫诱导表达及进化保守性。

10.土壤根际样品:根际微生物互作样本,评估间接环境因子对DREB表达的影响。

检测方法

国际标准:

  • ISO20166-4:2020分子生物学定量检测方法
  • ISO17025:2017实验室能力通用要求
国家标准:
  • GB/T28022-2011分子生物学实验规范
  • GB/Z18871-2002生物安全通用准则
方法差异说明:国际标准更注重全球互认性,要求仪器校准周期≤6个月;国家标准强调本土样本适应性,如在缓冲液pH控制范围(ISO为7.0-7.5,GB为6.8-7.2)和样品保存温度(ISO要求-80°C,GB允许-70°C)存在细微差异。

检测设备

1.实时荧光定量PCR仪:ABI7500Fast(动态范围:10^1-10^9copies/μl)

2.蛋白电泳系统:Bio-RadMini-PROTEANTetraCell(电压范围:50-300V)

3.化学发光成像仪:AzureBiosystemsc600(分辨率:6.5百万像素)

4.酶标仪:MolecularDevicesSpectraMaxiD5(波长范围:230-1000nm)

5.荧光显微镜:OlympusIX83(放大倍数:10-100x)

6.共聚焦显微镜:LeicaTCSSP8(激光波长:405-640nm)

7.核酸萃取仪:QiagenQIAcube(通量:12样本/批次)

8.离心机:Eppendorf5425R(转速:100-15000rpm)

9.恒温培养箱:MemmertINCOmed(温度范围:4-65°C)

10.超低温冰箱:ThermoScientificTSX500(温度:-86°C)

11.纯水系统:MerckMilliporeMilli-QIQ7000(电阻率:18.2MΩ·cm)

12.振荡器:IKAKS260orbitalshaker(转速:30-500rpm)

13.分光光度计:ShimadzuUV-1900i(波长精度:±0.3nm)

14.电穿孔仪:Bio-RadGenePulserXcell(电压:10-3000V)

15.凝胶成像系统:SyngeneG:BOXChemiXRQ(CCD分辨率:400万像素)

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

以上是与"DREB转录因子表达量测试"相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。

    材料检测服务

    专业分析各类金属、非金属材料的成分、结构与性能,提供全面检测报告和解决方案。包括金属材料力学性能测试、高分子材料老化试验、复合材料界面分析等。

    化工产品分析

    精准检测各类化工产品的成分、纯度及物理化学性质,确保产品质量符合国家标准。服务涵盖有机溶剂分析、催化剂表征、高分子材料分子量测定等。

    环境检测服务

    提供土壤、水质、气体等环境检测服务,助力环境保护与污染治理,共建绿色家园。包括VOCs检测、重金属污染分析、水质生物毒性测试等。

    科研检测认证

    凭借专业团队和先进设备,致力于为企业研发、质量控制及市场准入提供精准可靠的技术支撑,助力品质提升与合规发展。