检测项目
插入片段长度检测:检测范围100 bp-50 kb,分辨率±5%(Agilent 4200 TapeStation)
文库浓度测定:检测灵敏度0.1 ng/μL(Qubit 4.0荧光计),误差率≤5%
文库纯度分析:OD260/280比值1.8-2.0,OD260/230比值2.0-2.2(NanoDrop OneC)
覆盖均一性检测:GC含量偏差≤15%(Illumina NovaSeq 6000)
文库污染检测:外源DNA残留量≤0.1%(qPCR仪ABI QuantStudio 5)
检测范围
人类全基因组DNA文库(WGS文库)
植物cDNA全长文库(Clontech SMARTer技术构建)
微生物宏基因组文库(V4区16S rRNA扩增子文库)
单细胞转录组文库(10x Genomics平台构建)
目标区域捕获文库(IDT xGen锁定探针文库)
检测方法
ISO 21571:2005 分子生物学检测通则
GB/T 37872-2019 高通量测序文库质量要求
ASTM E3136-18 核酸定量标准方法
ISO 20395:2019 测序文库污染检测规范
GB/T 34797-2017 核酸片段分析电泳法
检测设备
Agilent 4200 TapeStation:片段分析系统,支持12-5000 bp范围检测
Thermo Fisher Qubit 4.0:荧光定量仪,检测范围0.1-1000 ng/μL
Illumina NovaSeq 6000:高通量测序仪,单次运行输出6 Tb数据
Bio-Rad CFX Opus 96:实时定量PCR系统,检测灵敏度达1拷贝/μL
Beckman Coulter Biomek i7:自动化工作站,移液精度±0.5%