检测项目
1. 酶活性测定:比活力(U/mg)、Km值(μmol/L)、Vmax(μmol/min·mg)
2. 蛋白质纯度分析:SDS-PAGE纯度(≥95%)、HPLC纯度(≥98%)
3. 分子量测定:质谱法精确分子量(±0.1 Da)、SEC-MALS绝对分子量
4. 热稳定性测试:Tm值(℃)、Tagg值(℃)
5. 底物特异性分析:ATP结合常数(Kd, μM)、底物抑制效应
检测范围
1. 重组表达体系:大肠杆菌/酵母表达的重组酶制剂
2. 细胞裂解液:哺乳动物细胞/原核细胞粗提液
3. 生物样本:血清/组织匀浆液中的内源性酶含量
4. 药物中间体:核苷类似物合成反应体系
5. 工业酶制剂:固定化酶载体催化效率评估
检测方法
1. ISO 18104:2023《生物催化酶活性测定通用规范》
2. ASTM E2694-21《紫外-可见分光光度法测定酶促反应速率》
3. GB/T 34800-2017《蛋白质纯度测定高效液相色谱法》
4. GB/T 38165-2019《临床质谱定量分析通则》
5. ISO 10993-18:2020《生物材料热稳定性差示扫描量热法》
检测设备
1. Thermo Scientific NanoDrop 8000:紫外分光光度计(蛋白浓度测定)
2. Agilent 1260 Infinity II HPLC:高效液相色谱系统(纯度分析)
3. Waters Xevo G2-XS QTOF:高分辨质谱仪(分子量确认)
4. Malvern Panalytical MicroCal PEAQ-DSC:差示扫描量热仪(热稳定性测试)
5. Beckman Coulter ProteomeLab PA 800:毛细管电泳系统(电荷异质性分析)
6. PerkinElmer EnVision:多功能酶标仪(高通量活性筛选)
7. Wyatt Technology DAWN HELEOS II:多角度光散射检测器(绝对分子量测定)
8. GE Healthcare ÄKTA pure 25:蛋白纯化系统(制备级样品处理)
9. Shimadzu RF-6000:荧光分光光度计(底物结合动力学研究)
10. Anton Paar Lovis 2000 ME:微量粘度计(溶液构象分析)