1. 酶活性测定:反应体系pH 7.4±0.2,温度37±0.5℃,底物浓度0.2-1.0mM L-丝氨酸
2. 比活力计算:单位定义(μmol产物/min/mg蛋白),线性范围0.5-5.0 U/mg
3. 动力学常数测定:Km值(四氢叶酸)0.05-0.15mM;Vmax值≥20nmol/(min·mg)
4. 热稳定性测试:37℃孵育0-120min后残余活性≥80%
5. 抑制剂敏感性:IC50值测定(氨基蝶呤类化合物)精度±5%
1. 临床样本:人血清/血浆(肝素抗凝)、脑脊液
2. 细胞样本:哺乳动物细胞裂解液(HepG2、HEK293等)
3. 组织样本:肝脏/肾脏/脑组织匀浆液(RIPA缓冲液提取)
4. 重组蛋白:大肠杆菌/酵母表达系统纯化产物(纯度≥90%)
5. 植物源材料:拟南芥叶片提取物(Tris-HCl缓冲液制备)
1. 分光光度法:ISO 15193:2009《体外诊断器具酶活性测量》
2. HPLC法:GB/T 37862-2019《生物制品中酶活性测定通用要求》<3级偏差
3. 同位素标记法:ASTM E2934-13《放射性示踪酶动力学分析》
4. 荧光共振能量转移法:ISO/TS 20922:2016《分子诊断用荧光探针技术规范》
5. 质谱定量法:GB/T 40154-2021《生物质谱定量分析方法验证指南》
1. Thermo Scientific Multiskan SkyHigh酶标仪:波长范围340nm/450nm双通道监测
2. Agilent 1260 Infinity II HPLC系统:C18色谱柱(4.6×150mm,5μm)
3. Beckman Coulter AU5800全自动生化分析仪:预置SHMT专用测试程序
4. Waters Xevo TQ-S微升流质谱仪:MRM模式定量精度±1.5%
5. Eppendorf Mastercycler X50 PCR仪:温控精度±0.1℃(热稳定性测试)
6. Malvern Zetasizer Nano ZS90动态光散射仪:蛋白聚集度分析(粒径≤50nm)
7. Bio-Rad ChemiDoc MP成像系统:Western blot定量分析(灰度值CV≤5%)
8. Metrohm 848 Titrino Plus自动滴定仪:缓冲液pH校准精度±0.01
9. PerkinElmer Lambda 365紫外分光光度计:带宽1nm,波长准确度±0.3nm
10. Mettler Toledo XPR205DR微量天平:称量精度0.01mg(底物称量)
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。
以上是与丝氨酸羟甲基转移酶相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。