检测项目
1.形态特征鉴定:体长0.8-1.2mm,触角8节,前翅缨毛排列密度≥18根/mm
2.分子生物学检测:COI基因序列比对(GenBank登录号KF015427),ITS1区段扩增引物5'-CCTGCGGAAGGATCATT-3'
3.种群密度测定:单位叶片虫口数≤5头/叶为安全阈值
4.抗药性监测:LC50值测定(拟除虫菊酯类≥50mg/L判定为高抗性)
5.寄主适应性分析:柑橘新梢受害率>30%需启动应急防控
检测范围
1.柑橘属植物新鲜叶片(脐橙、蜜柑、柚子等)
2.果实表皮组织样本(直径>3cm的幼果至成熟果)
3.枝条韧皮部切片(采集长度≥10cm的一年生枝条)
4.土壤表层虫蛹(深度0-5cm的根际土壤)
5.包装材料残留物(木质托盘、纸箱等运输载体)
检测方法
1.ISO21702:2017植物检疫害虫形态学鉴定规程
2.GB/T36851-2018农业害虫分子生物学检测通则
3.ASTME1752-17昆虫抗药性生物测定标准方法
4.SN/T4283.5-2015出境柑橘检疫规程第5部分:蓟马科
5.GB15569-2009农业植物检疫实验室技术规范
检测设备
1.OlympusBX53生物显微镜:配备DP27数码成像系统,放大倍率40-1000X
2.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪:支持TaqMan探针法检测
3.ShimadzuUV-2600i分光光度计:DNA浓度测定波长260/280nm
4.EppendorfCentrifuge5430R高速冷冻离心机:最大转速30,000rpm
5.MemmertICP800培养箱:温度控制精度0.1℃,用于虫体饲养观察
6.LeicaCM1950冰冻切片机:样本制备厚度10-30μm
7.SartoriusCP225D电子天平:称量精度0.01mg
8.ThermoScientificHeratherm高级烘箱:温度范围40-300℃灭菌处理
9.HaierDW-86L626超低温冰箱:-86℃长期保存样本
10.Agilent7890B气相色谱仪:拟除虫菊酯类农药残留分析