检测项目
1.成虫翅脉特征测量:前翅长12-18mm,R5脉与M1脉间距≤0.3mm
2.幼虫头壳宽度测定:末龄幼虫头壳宽度≥2.8mm0.15mm
3.COI基因序列比对:目标片段658bp,与NCBI数据库相似度≥98.5%
4.乙酰胆碱酯酶活性测试:抑制率≥70%判定为抗药性个体
5.卵块孵化率统计:25℃恒温条件下孵化率≤85%需复检
检测范围
1.玉米/水稻田间采集的幼虫及蛹体样本
2.粘虫板捕获的成虫翅部残体
3.土壤中越冬虫卵DNA提取物
4.实验室人工饲料喂养的F3代试虫
5.转基因作物叶片残留取食痕迹样本
检测方法
ISO21571:2013《分子生物学检测通用技术要求》
GB/T34756-2017《鳞翅目害虫抗药性监测规范》
ASTME1756-08(2020)昆虫形态学显微测量标准
GB/T34757-2017《农作物害虫DNA条形码鉴定规程》
ISO21569:2005《食品链微生物学-分析方法验证》
检测设备
NikonEclipseNi-U生物显微镜(40-1000带微分干涉功能)
Bio-RadT100ThermalCyclerPCR仪(温控精度0.2℃)
ThermoScientificMultiskanSkyHigh酶标仪(波长范围340-850nm)
SartoriusCP225D电子天平(量程220g/0.01mg)
Agilent4200TapeStation系统(DNA完整性指数≥7.0)
LeicaCM1950冷冻切片机(切片厚度5-50μm可调)
EppendorfCentrifuge5430R高速离心机(最大转速30,000rpm)
OlympusSZX16体视显微镜(变焦比16.4:1)