检测项目
1.成虫形态学鉴定:体长范围3.8-4.5mm,鞘翅黄褐色斑纹特征分析(斑纹数量≥3组)
2.COI基因序列比对:目标片段长度658bp,与NCBI数据库相似度≥99%
3.抗药性基因筛查:CYP6家族P450酶活性测定(OD值≥0.45)
4.卵期发育监测:卵粒直径0.35-0.42mm,孵化率统计(温度251℃)
5.寄主植物残留物检测:取食痕迹DNA提取浓度≥20ng/μL
检测范围
1.水稻、玉米等禾本科作物叶片样本(单株虫口密度≥5头)
2.松木、杉木等针叶树原木及加工制品(截获活体成虫需复检)
3.进出口集装箱木质包装材料(ISPMNo.15标准适用对象)
4.有机肥原料中幼虫残留筛查(样本量≥500g)
5.植物检疫证书核验样本(重点核查东南亚来源货物)
检测方法
1.ISO21571:2005《分子生物学检测基本操作规范》
2.GB/T27639-2011《昆虫标本制作与保存技术规程》
3.ASTME1752-17《显微成像系统校准标准》
4.SN/T2034-2018《进出境植物检疫昆虫DNA条形码鉴定方法》
5.GB/T34748-2017《昆虫抗药性监测技术规范》
检测设备
1.OlympusBX53荧光显微镜(400物镜观察鞘翅微结构)
2.Bio-RadT100PCR仪(退火温度梯度设置55-65℃)
3.Agilent4200TapeStation系统(DNA完整性指数≥7)
4.LeicaM205C体视显微镜(景深合成功能用于卵粒测量)
5.ThermoScientificMultiskanFC酶标仪(波长450nm抗药性测定)
6.EppendorfCentrifuge5430R(离心力15000g样本处理)
7.ShimadzuGCMS-QP2020NX(挥发性信息素成分分析)
8.KeyenceVHX-7000数码显微系统(三维形貌重建精度1μm)