检测项目
1.HPRT1基因全外显子测序：覆盖9个外显子区域（NM_000194.4），检测点突变/缺失/插入变异
2.次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT）活性测定：正常参考值＞1.6nmol/(hmgprotein)
3.血清尿酸浓度测定：电化学法检测范围0-2000μmol/L
4.尿嘌呤代谢物分析：黄嘌呤/次黄嘌呤比值（X/HX）＞2.0为阳性指标
5.成纤维细胞培养酶学验证：采用同位素标记法（14C-次黄嘌呤）测定酶动力学参数
检测范围
1.全血样本（EDTA抗凝）：用于基因组DNA提取及HPRT1基因测序
2.干燥血斑（DBS）：新生儿筛查适用样本类型
3.脑脊液（CSF）：黄嘌呤浓度测定（＞3μmol/L为异常）
4.培养成纤维细胞：酶活性验证的黄金标准样本
5.羊水细胞：产前诊断需结合STR分型排除母源污染
检测方法
1.Sanger测序法：遵循ISO15189医学实验室标准进行HPRT1基因突变验证
2.高效液相色谱法（HPLC）：依据GB/T30988-2014测定嘌呤代谢产物
3.串联质谱技术（LC-MS/MS）：参照CLSIC62-A标准进行尿嘧啶类物质定量
4.放射性同位素标记法：执行ASTME170-17规范测定HGPRT酶活性
5.MLPA技术：采用MRC-HollandP015-B2试剂盒进行大片段缺失检测
检测设备
1.IlluminaMiSeq测序仪：双末端300bp读长模式进行HPRT1基因深度测序
2.Agilent1260InfinityIIHPLC系统：配备DAD检测器（λ=254nm）用于嘌呤分离分析
3.ABSciexTripleQuad6500+质谱仪：MRM模式定量尿中次黄嘌呤/黄嘌呤含量
4.PerkinElmerTri-Carb4910TR液闪仪：测量14C标记底物的放射性活度（dpm值）
5.ThermoScientificMultiskanSkyHigh酶标仪：450nm波长下完成ELISA法尿酸测定
6.EppendorfMastercyclerX50PCR仪：梯度温控精度0.1℃的扩增系统
7.Bio-RadChemiDocMP成像系统：毛细管电泳片段分析分辨率达1bp/300bp
8.BeckmanCoulterAU5800生化分析仪：尿酸氧化酶法测定血清尿酸浓度
9.LeicaDMi8倒置显微镜：200相位差观察成纤维细胞形态学特征
10.MRCHollandMLPA杂交箱：精确控制37℃0.5℃的探针杂交温度