检测项目

1.HPRT1基因全外显子测序：覆盖9个外显子区域（NM_000194.4），检测点突变/缺失/插入变异

2.次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT）活性测定：正常参考值＞1.6nmol/(hmgprotein)

3.血清尿酸浓度测定：电化学法检测范围0-2000μmol/L

4.尿嘌呤代谢物分析：黄嘌呤/次黄嘌呤比值（X/HX）＞2.0为阳性指标

5.成纤维细胞培养酶学验证：采用同位素标记法（14C-次黄嘌呤）测定酶动力学参数

检测范围

1.全血样本（EDTA抗凝）：用于基因组DNA提取及HPRT1基因测序

2.干燥血斑（DBS）：新生儿筛查适用样本类型

3.脑脊液（CSF）：黄嘌呤浓度测定（＞3μmol/L为异常）

4.培养成纤维细胞：酶活性验证的黄金标准样本

5.羊水细胞：产前诊断需结合STR分型排除母源污染

检测方法

1.Sanger测序法：遵循ISO15189医学实验室标准进行HPRT1基因突变验证

2.高效液相色谱法（HPLC）：依据GB/T30988-2014测定嘌呤代谢产物

3.串联质谱技术（LC-MS/MS）：参照CLSIC62-A标准进行尿嘧啶类物质定量

4.放射性同位素标记法：执行ASTME170-17规范测定HGPRT酶活性

5.MLPA技术：采用MRC-HollandP015-B2试剂盒进行大片段缺失检测

检测设备

1.IlluminaMiSeq测序仪：双末端300bp读长模式进行HPRT1基因深度测序

2.Agilent1260InfinityIIHPLC系统：配备DAD检测器（λ=254nm）用于嘌呤分离分析

3.ABSciexTripleQuad6500+质谱仪：MRM模式定量尿中次黄嘌呤/黄嘌呤含量

4.PerkinElmerTri-Carb4910TR液闪仪：测量14C标记底物的放射性活度（dpm值）

5.ThermoScientificMultiskanSkyHigh酶标仪：450nm波长下完成ELISA法尿酸测定

6.EppendorfMastercyclerX50PCR仪：梯度温控精度0.1℃的扩增系统

7.Bio-RadChemiDocMP成像系统：毛细管电泳片段分析分辨率达1bp/300bp

8.BeckmanCoulterAU5800生化分析仪：尿酸氧化酶法测定血清尿酸浓度

9.LeicaDMi8倒置显微镜：200相位差观察成纤维细胞形态学特征

10.MRCHollandMLPA杂交箱：精确控制37℃0.5℃的探针杂交温度

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

　　以上是与莱默二氏营养不良检测相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。