检测项目
1.分子量测定:采用SDS-PAGE与质谱联用技术(范围10-250kDa),偏差≤0.5%
2.纯度分析:HPLC法(C18色谱柱),纯度≥98.5%
3.糖基化修饰鉴定:MALDI-TOF质谱(质量精度≤50ppm),单糖组成比例分析
4.等电点测定:毛细管等电聚焦法(pH3.0-9.0),重复性RSD≤1.0%
5.生物活性测试:细胞受体结合实验(EC50值≤10nM)
检测范围
1.转基因植物表达的甜蛋白原前体提取物
2.功能性食品添加剂中的重组甜蛋白制剂
3.生物制药中间体(如索马甜、莫内林前体)
4.天然植物源甜味剂粗提物(奇迹果、甘草等)
5.体外诊断试剂用标记蛋白原料
检测方法
1.ISO21572:2019《食品中蛋白质检测通用方法》
2.ASTME2694-21《重组蛋白纯度测定标准指南》
3.GB/T35809-2018《糖蛋白中糖链分析技术规范》
4.GB/T38164-2019《食用蛋白质制品中氨基酸组成测定》
5.ISO20633:2015《生物技术产品中宿主细胞蛋白残留量测定》
检测设备
1.ThermoScientificQExactiveHF-X质谱仪:高分辨分子量测定(分辨率240,000)
2.Agilent1260InfinityIIHPLC系统:纯度分析与杂质定量
3.BeckmanPA800Plus毛细管电泳仪:等电点精确测定
4.WatersACQUITYUPLCH-Class系统:糖基化位点快速解析
5.MalvernZetasizerNanoZSP:动态光散射法测定聚集状态
6.ShimadzuUV-2700分光光度计:蛋白质浓度定量(A280法)
7.PerkinElmerEnSpire多功能酶标仪:生物活性EC50值测定
8.BrukerDaltonicsultrafleXtremeMALDI-TOF:糖链结构表征
9.EppendorfBioSpectrometerbasic:快速蛋白质浓度筛查
10.GEHealthcareKTApure25层析系统:制备级样品纯化