检测项目

1.病毒核酸检测：采用qPCR技术定量分析GPVC1基因片段，灵敏度≥10^2copies/μL

2.抗体效价测定：通过ELISA法检测IgG抗体水平，判定阈值≥1:256

3.病毒分离培养：接种12日龄鹅胚尿囊腔，观察72小时典型病变（胚体出血/水肿）

4.病理组织学检查：HE染色观察肠道淋巴组织坏死及嗜酸性包涵体

5.环境样本病毒载量：采用磁珠法提取粪便/垫料样本核酸，检出限≤50copies/g

检测范围

1.病死鹅肝/脾/肠组织样本

2.种蛋及胚胎卵黄囊液

3.饲料及饮用水污染监测

4.疫苗效力评价用攻毒毒株

5.养殖场环境拭子（笼具/孵化器表面）

检测方法

1.GB/T22917-2008《小鹅瘟诊断技术》规定病毒分离与中和试验流程

2.ISO16140-3:2021《分子生物学方法验证指南》指导qPCR扩增程序

3.OIE《陆生动物诊断试验手册》第3.3.12章血清学检测规范

4.GB/T35910-2018《动物疫病PCR检测通则》核酸提取质控要求

5.ASTME2396-19《兽医诊断试剂盒性能验证标准》

检测设备

1.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪（温度精度0.1℃）

2.BioTekELx808全自动酶标仪（波长范围340-850nm）

3.EppendorfCentrifuge5430R高速冷冻离心机（最大转速30,000rpm）

4.LeicaRM2235轮转式切片机（切片厚度1-60μm可调）

5.MemmertCO₂培养箱（温度波动0.3℃，CO₂控制精度0.1%）

6.NanoDropOne超微量分光光度计（测量范围2-27,500ng/μL）

7.KingFisherFlex全自动核酸提取系统（通量96样本/批次）

8.OlympusBX53荧光显微镜（配备DP80双摄像头系统）