检测项目
1.全血硫胺素浓度测定:参考区间45-90nmol/L
2.转酮醇酶活性系数(ETK-AC):阈值>1.25提示缺乏
3.尿中硫胺素排泄量:24小时尿<100μg/d为异常
4.红细胞转酮醇酶活性:正常范围>0.78μmol/gHb/h
5.血浆乳酸浓度:空腹值>2.0mmol/L提示代谢异常
6.脑脊液丙酮酸浓度:临界值>0.23mmol/L
检测范围
1.临床样本:全血/血清/脑脊液/尿液/组织活检标本
2.食品基质:谷物制品/婴幼儿配方奶粉/营养强化剂/肉制品/速溶饮品
3.生物制品:复合维生素制剂/肠外营养液/医用特殊食品
4.环境样本:水体/土壤中硫胺素降解产物监测
5.饲料原料:畜禽配合饲料/水产养殖预混料/宠物食品添加剂
检测方法
1.HPLC法(ISO21422:2018):采用荧光检测器定量分析
2.微生物法(GB/T5009.197-2003):利用乳酸杆菌生长依赖性测定
3.酶联免疫法(ASTMD8087-18):快速筛查食品中硫胺素含量
4.毛细管电泳法(GB/T30987-2014):高分辨率分离硫胺素磷酸酯
5.同位素稀释质谱法(ISO20633:2015):血清样本准确定量金标准
检测设备
1.Agilent1260InfinityIIHPLC:配备荧光检测器(Ex365nm/Em435nm)
2.ThermoScientificMultiskanSkyHigh酶标仪:支持微生物法吸光度测定
3.WatersXevoTQ-S质谱仪:实现痕量级同位素内标定量分析
4.BeckmanPA800Plus毛细管电泳系统:专用分离缓冲液体系配置
5.HitachiUH4150紫外分光光度计:用于转酮醇酶活性动力学测定
6.RocheCobasc501生化分析仪:配套乳酸/丙酮酸试剂盒自动化检测
7.EppendorfMastercyclerPCR仪:微生物法前处理恒温培养模块
8.Metrohm850ProfessionalIC离子色谱:监测硫胺素降解产物分析