检测项目

1.蛋白纯度测定：采用SEC-HPLC法（色谱柱TSKgelG3000SWxl），纯度≥98.0%

2.比活性分析：显色底物法（S-2444），活性范围80000-120000IU/mg

3.宿主蛋白残留量：ELISA法检测（灵敏度≤1.0ng/mg）

4.内毒素水平：动态显色法鲎试剂（限值＜0.5EU/mg）

5.分子量测定：MALDI-TOF质谱（理论值47.5kDa0.5%）

6.等电点分析：毛细管等电聚焦（pI8.3-8.7）

7.氧化修饰检测：RP-HPLC法（氧化峰占比≤3.0%）

检测范围

1.重组人尿激酶原原料药（冻干粉/溶液）

2.注射用无菌制剂（西林瓶/预灌封）

3.中间体发酵液（CHO细胞表达体系）

4.纯化工艺洗脱液（亲和层析组分）

5.稳定性研究样品（加速/长期试验样本）

6.辅料相容性测试样品（甘露醇/蔗糖体系）

检测方法

1.中国药典2020年版三部（通则3406重组治疗类制品）

2.USP<121>注射用蛋白制品质量规范

3.ISO17025:2017实验室管理体系要求

4.GB/T191-2008直接接触药品包装材料测试

5.ASTME2694-21紫外分光光度法通则

6.EP2.6.14肽图分析技术指南

检测设备

1.Agilent1260InfinityIIHPLC系统：配备DAD检测器（190-900nm），用于纯度分析

2.ThermoScientificQExactiveHF质谱仪：分辨率240,000FWHM，精确分子量测定

3.WatersACQUITYUPLCH-Class系统：BEH300C4色谱柱（1.7μm），肽图分析

4.MalvernPanalyticalZetasizerPro：动态光散射技术（DLS），粒径分布检测

5.PerkinElmerEnSpire多功能酶标仪：波长范围230-1000nm，ELISA定量分析

6.ShimadzuUV-2600i分光光度计：带宽1nm，A280法蛋白浓度测定

7.GEHealthcareKTApure25层析系统：UNICORN软件控制纯化工艺验证

8.MettlerToledoSevenExcellencepH计：精度0.001pH，溶液理化参数测试

9.SartoriusCPA225D电子天平：最小读数0.01mg，精密称量控制

10.EppendorfMastercyclerX50PCR仪：温度精度0.1℃，DNA残留量检测