检测项目

1.酶活性测定：单位时间NADH氧化速率（U/mg蛋白），波长340nm监测吸光度变化

2.辅酶Q结合能力：通过差示光谱法测定QH2/Q比值（550-580nm）

3.蛋白质浓度测定：BCA法（562nm）或Lowry法（750nm）定量样本总蛋白

4.抑制剂敏感性测试：抗霉素A半数抑制浓度（IC50）测定（浓度梯度0.1-100nM）

5.热稳定性分析：37℃温育0-60min后残余活性百分比测定

检测范围

1.哺乳动物组织线粒体提取物（肝/心肌/骨骼肌）

2.细胞培养物裂解液（HEK293/HeLa/HepG2等细胞系）

3.临床活检样本（冰冻保存的肌肉/肝脏组织）

4.重组表达体系（大肠杆菌/酵母表达的重组酶蛋白）

5.药物筛选样本（小分子化合物库处理后的酶活性测试）

检测方法

ISO15189:2012《医学实验室质量和能力要求》第5.5条款酶学检测规范

GB/T27404-2008《实验室质量控制规范理化检测》第6章光谱分析法

ASTME2935-18《StandardGuideforEnzymeActivityMeasurements》动力学分析章节

GB/T22244-2008《保健食品中辅酶Q10的测定》HPLC法改良方案

CLSIEP05-A3《EvaluationofPrecisionofQuantitativeMeasurementProcedures》精密度验证要求

检测设备

1.ThermoScientificMultiskanSkyHigh全波长酶标仪：波长范围200-1000nm，温控精度0.1℃

2.Agilent1260InfinityII高效液相色谱系统：配备DAD检测器（190-950nm）

3.BeckmanCoulterOptimaXPN-100超速离心机：最大转速100,000rpm（894,000g）

4.EppendorfBioSpectrometerbasic紫外分光光度计：波长精度1nm（190-830nm）

5.MettlerToledoSevenExcellencepH计：测量精度0.001pH单位

6.SartoriusCubisII微量天平：最小称量值0.1μg（量程2.1g）

7.BioradT100PCR仪：温度均一性0.25℃（适配酶热稳定性试验）

8.PerkinElmerLambda365UV/Vis分光光度计：带宽0.5-5nm可调双光束系统

9.EppendorfMastercyclerX50低温离心机：温控范围-20℃至40℃

10.Metrohm859Titrotherm自动滴定系统：分辨率0.001mL的精密加样控制