检测项目
1.病毒抗原检测:采用双抗体夹心ELISA法,灵敏度≥95%,特异性≥98%,最低检出限0.1ng/mL
2.RNA核酸检测:实时荧光定量PCR法(RT-qPCR),扩增效率90-110%,Ct值≤38判定阳性
3.中和抗体效价测定:微量中和试验(MNT),血清稀释梯度1:8至1:1024
4.血凝抑制试验(HI):使用豚鼠红细胞悬液(0.5%浓度),效价≥1:16判定阳性
5.病毒分离培养:MDCK细胞系培养(ATCCCCL-34),CPE观察周期3-7天
检测范围
1.鼻咽拭子样本:采集部位为鼻甲后部黏膜层
2.血清样本:无菌采集静脉血3-5mL
3.支气管肺泡灌洗液:采集量≥2mL
4.流产胎儿组织:优先采集肺、肝及脾脏组织
5.环境拭子:马厩食槽、饮水器等表面采样面积1010cm
检测方法
1.ISO17025:2017《实验室质量体系要求》
2.GB/T22917-2008《马鼻肺炎诊断技术规范》
3.OIETerrestrialManual2023Chapter3.5.9
4.ASTME2888-19《动物疫病分子诊断标准指南》
5.GB/T35911-2018《荧光定量PCR仪性能要求》
检测设备
1.AppliedBiosystems7500实时荧光定量PCR仪:支持TaqMan探针法
2.ThermoMultiskanFC酶标仪:波长范围340-850nm
3.EppendorfCentrifuge5424R:最大转速15,000rpm
4.Bio-RadChemiDocMP成像系统:CCD分辨率13601024像素
5.NuAireNU-583生物安全柜:HEPA过滤效率99.99%
6.MemmertCO2培养箱:温度控制精度0.1℃
7.SartoriusQuintix224-1CN分析天平:称量精度0.1mg
8.HamiltonMICROLABSTARlet移液工作站:体积范围1-1000μL
9.OlympusCX43生物显微镜:最大放大倍数1000
10.PanasonicMDF-UB53V超低温冰箱:温度范围-50℃至-86℃