检测项目

1.病毒抗原ELISA检测：灵敏度≥95%，特异性≥98%，最低检出限110^3VP/mL

2.实时荧光定量RT-PCR：靶标区域ORF1/ORF2连接区，Ct值≤38判定阳性

3.全基因组测序分析：覆盖度≥99%，测序深度≥100

4.环境样本富集检测：离心浓缩法回收率≥60%，PEG沉淀法回收率≥45%

5.血清分型中和试验：抗体效价≥1:64判定阳性反应

检测范围

1.临床样本：粪便悬液（10%w/v）、呕吐物提取液

2.食品基质：贝类消化腺组织（牡蛎/蛤蜊）、生鲜果蔬表面冲洗液

3.水体样本：污水厂进水（过滤0.22μm膜）、饮用水源水

4.环境拭子：门把手/餐具表面采样（25cm区域）

5.冷链食品包装：-20℃保存运输的冷冻食品外包装棉拭子

检测方法

ISO15216-1:2017食品中诺如病毒实时RT-PCR检测法

GB/T34789-2017临床标本诺如病毒核酸检测规范

ASTME3218-20环境表面病毒富集与提取指南

WS/T797-2022诺如病毒感染暴发调查技术规范

FDABAMChapter26b:贝类中诺如病毒分子检测方案

检测设备

1.ABIQuantStudio7Pro实时荧光定量PCR仪：支持TaqMan探针法多重检测

2.ThermoKingFisherFlex核酸提取仪：磁珠法提取效率≥90%

3.IlluminaMiSeq测序平台：PE300模式完成全基因组组装

4.PallGeneDiscCycler便携式PCR仪：现场快速筛查（45min出结果）

5.BeckmanCoulterAllegraX-15R离心机：最大RCF15,000g

6.MilliporeSterivex-GP压力过滤系统：处理大体积水样（10L/次）

7.BioTekSynergyH1酶标仪：ELISA结果OD450/630双波长读取

8.Eppendorf5430低温高速离心机：4℃条件下病毒颗粒沉淀

9.SartoriusBiostatB-DCU生物反应器：病毒培养扩增（3D悬浮培养）

10.LeicaDMi8倒置荧光显微镜：细胞病变效应（CPE）观察