检测项目
1.成虫形态特征鉴定:体长18-22mm,翅展38-45mm,前翅灰褐色具波浪形横纹
2.幼虫分子生物学检测:COI基因序列比对(GenBank登录号KY464215-KY464220)
3.卵粒显微分析:直径0.6-0.8mm,表面纵脊数12-14条
4.寄主植物残留物DNA提取:CTAB法提取效率≥95%,浓度≥20ng/μL
5.抗药性基因筛查:CYP6AE20基因表达量测定(qPCRCt值≤28)
6.种群遗传多样性分析:微卫星位点LD-03/LD-07扩增片段长度多态性
检测范围
1.进出口农产品(玉米、大豆等谷物及其加工制品)
2.林业苗木(杨树、柳树等阔叶树种幼苗)
3.仓储运输工具(集装箱内壁残留物样本)
4.植物检疫截获物(成虫标本及卵块样本)
5.土壤环境样本(越冬蛹体分离鉴定)
6.生物防治载体(寄生蜂体内靶标DNA追踪)
检测方法
1.ISO21772:2018《植物检疫-鳞翅目害虫形态鉴定规范》
2.GB/T35334-2017《外来有害生物DNA条形码检测规程》
3.ASTME2810-18《实时荧光定量PCR法昆虫抗药性测定》
4.SN/T2967-2011《植物检疫昆虫标本制作与保存技术》
5.EPAMethod1623.1《环境样本中昆虫DNA提取与纯化》
检测设备
1.奥林巴斯BX53研究级显微镜(配DP27摄像系统):400下观测鳞片结构
2.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪:灵敏度达1pg/μLDNA
3.EppendorfCentrifuge5430R高速冷冻离心机:最大转速30,000rpm
4.BeckmanCoulterCEQ8000遗传分析仪:微卫星分型精度1bp
5.LeicaEMCPD300临界点干燥仪:虫体标本脱水处理
6.MilestoneETHOSX微波消解系统:土壤样本前处理
7.Agilent4200TapeStation系统:DNA完整性评估(DIN值≥7)
8.NikonSMZ25体视显微镜:卵粒表面微结构三维成像