检测项目

1.结合亲和力测定：平衡解离常数（Kd）范围10^-4-10^-12M

2.结合位点分析：表观结合位点数（n=0.8-1.2）

3.动力学参数测定：结合速率常数（kon）110^3-110^7M^-1s^-1；解离速率常数（koff）110^-6-110^1s^-1

4.热稳定性评估：Tm值变化范围15℃

5.结构表征：结合界面分辨率≤3

检测范围

1.重组蛋白：大肠杆菌/哺乳动物表达系统制备的纯化蛋白

2.抗体药物：单克隆抗体/双特异性抗体的抗原结合域验证

3.细胞裂解液：内源性蛋白复合物的共沉淀分析

4.膜蛋白体系：GPCR与配体蛋白的相互作用研究

5.纳米颗粒偶联物：蛋白修饰载体的结合效率验证

检测方法

ISO5868-2020表面等离子体共振技术通则

ASTME2968-21等温滴定量热法操作规范

GB/T34814-2017荧光共振能量转移法测定通则

ISO10993-22:2017生物材料蛋白质吸附试验方法

GB/T39150-2020微量热泳动技术应用指南

检测设备

BiacoreT200：表面等离子体共振仪，实时监测结合动力学参数

MicroCalPEAQ-ITC：等温滴定量热仪，测量焓变与熵变值

OctetRED384e：生物膜干涉仪，支持高通量亲和力筛选

JascoJ-1500：圆二色光谱仪，分析二级结构变化

NanoTemperMonolithNT.115：微量热泳动仪，适用于低溶解度样本

ThermoOrbitrapFusionLumos：高分辨质谱仪，解析复合物组成

MalvernZetasizerUltra：动态光散射仪，测定复合物粒径分布

Cytation5：多功能酶标仪，完成FRET/BRET实验检测