检测项目
1.菌核形态特征:直径0.5-3.0mm/颜色黑褐/表面粗糙度
2.菌丝生长速率:25℃PDA培养基日增长量≥8mm
3.子囊孢子尺寸:8-124-6μm/椭圆形/单胞透明
4.致病性测试:离体叶片接种48h病斑扩展直径≥15mm
5.分子生物学检测:ITS序列比对相似度≥99%/特异性引物SC1/SC2扩增产物235bp
检测范围
1.香石竹种苗(根/茎/叶组织样本)
2.鲜切花产品(花梗基部切口部位)
3.栽培基质(泥炭/珍珠岩混合料)
4.包装材料(接触面残留物)
5.周边植物(菊科/蔷薇科寄主筛查)
检测方法
ISO16140-3:2022微生物学方法验证规范
GB/T28084-2011植物病原菌分离培养技术规程
ASTME3066-2016分子生物学检测通用要求
GB/T3543.5-1995农作物种子检验规程病害检验
SN/T2127-2008进出境植物检疫菌核病鉴定方法
检测设备
1.Bio-RadCFX96实时荧光定量PCR仪(DNA扩增与定量分析)
2.OlympusBX53荧光显微镜(400显微形态观察)
3.MemmertIPP110培养箱(温度精度0.5℃)
4.SartoriusCP225D电子天平(称量精度0.01mg)
5.ThermoScientific1300系列生物安全柜(A2型二级防护)
6.Eppendorf5430R高速冷冻离心机(最大转速30,000rpm)
7.MilestoneETHOSEZ微波消解仪(样本前处理)
8.ShimadzuUV-2600i分光光度计(核酸浓度测定)
9.ESCOAC2-4S1超净工作台(百级洁净度)
10.HiMediaM1297真菌专用培养基(PDA改良配方)