可送检的样品类型与对应检测项目
| 样品类型 | 典型应用场景 | 主要检测项目 | 常用方法 / 参考 |
|---|---|---|---|
| 稻曲病注射接种水稻穗部（颖壳、穗轴） | 抗病种质筛查、接种条件标准化、致病力验证 | 病情指数、抗性分级、注射接种发病率 | NY/T 3625-2020稻曲病抗性鉴定技术规程；DB43/T 1144-2015水稻稻曲病注射接种技术规程 |
| 农杆菌注射浸润瞬时表达叶片（本氏烟草、生菜、番茄） | 外源基因瞬时表达验证、启动子活性分析、蛋白功能研究 | 外源基因定性筛查、瞬时表达率、目的蛋白含量 | DB15/T 2188-2021农杆菌介导遗传转化技术规程；GB/T 19495.4-2018实时荧光定性PCR |
| 转化再生植株与注射胚囊、子房样本（棉花、大豆、玉米） | 基因功能研究、新品系转化体鉴定 | 外源基因拷贝数定量、品系特异性成分定量 | GB/T 19495.5-2018实时荧光定量PCR；GB/T 38132-2019转基因植物品系定量检测数字PCR法 |
| 树干注药林木样本（松树树皮、木质部、针叶） | 松材线虫病注药防控、药剂传导分布评估 | 有效成分浓度、传导高度与横向分布、注药孔愈合状况 | DB3502/T 174-2025松材线虫病防治技术规程 树干注药法 |
| 激素与信号分子注射处理植株（幼苗、幼果、茎段） | 激素调控机理研究、胁迫响应与复原分析 | 生长素、赤霉素、细胞分裂素、脱落酸、茉莉酸、水杨酸等内源激素谱 | NY/T 2871-2015液相色谱-串联质谱法；GB/T 38484-2020细胞学评价法 |
| 注射处理后生理生化样品（叶片、茎秆、籽粒） | 处理效应评价、品质与衰老指标跟踪 | 游离氨基酸组分、叶绿素a与叶绿素b、可溶性糖、丙二醛 | GB/T 30987-2020植物中游离氨基酸的测定；NY/T 4357-2023叶绿素高效液相色谱法 |
| 注射用接种物质控样本（分生孢子悬液、农杆菌菌液） | 接种物浓度与活性控制、侵染力标定 | 孢子浓度、菌落形成单位、活力效价 | DB43/T 1144-2015接种液配制要求；GB/T 38577-2020指示植物法 |
检测项目
1. 注射接种抗病性评价：病情指数0～100，按免疫、高抗、中抗、感病分级，平行接种发病率变异系数不大于15%
2. 外源基因定性筛查：实时荧光定性PCR，检测限不高于0.1%（质量分数），覆盖常用启动子、终止子、标记基因与目的基因
3. 转化体拷贝数定量：实时荧光定量PCR或数字PCR，定量范围0.1%～10%，定量限可低至0.05%
4. 内源激素多组分定量：生长素、赤霉素类、细胞分裂素类、脱落酸、茉莉酸、水杨酸等43种激素同时测定，检出限达μg/kg级
5. 生理生化指标：17种游离氨基酸组分与总量、叶绿素a与叶绿素b及总量（mg/kg级）、可溶性糖、丙二醛等胁迫指标
6. 药剂残留与传导分布：树干注药有效成分在木质部、树皮、针叶中的浓度分布（mg/kg级），纵向传导高度与横向扩散距离
检测范围
1. 粮食作物：水稻、小麦、玉米的注射接种抗病鉴定材料与转化再生植株
2. 经济作物：棉花、大豆、油菜的遗传转化与注射处理样本
3. 蔬菜与模式植物：本氏烟草、番茄、生菜的农杆菌浸润叶片
4. 林木：松树、杨树等树干注药处理的树皮、木质部与针叶样本
5. 园艺作物：葡萄、月季等激素注射处理的幼果、茎段样品
检测方法
1. NY/T 3625-2020 稻曲病抗性鉴定技术规程
2. DB43/T 1144-2015 水稻稻曲病注射接种技术规程
3. GB/T 19495.4-2018 转基因产品检测 实时荧光定性聚合酶链式反应（PCR）检测方法
4. GB/T 19495.5-2018 转基因产品检测 实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）检测方法
5. NY/T 2871-2015 水稻中43种植物激素的测定 液相色谱-串联质谱法
6. GB/T 30987-2020 植物中游离氨基酸的测定
7. NY/T 4357-2023 植物源性食品中叶绿素的测定 高效液相色谱法
8. GB/T 38484-2020 植物激素类次生代谢产物的生物活性测定 细胞学评价法
检测设备
1. 实时荧光定量PCR仪：支持染料法与探针法双模式，升降温速率最高6℃/s，孔间温度均匀性±0.2℃，激发检测通道5个以上
2. 液相色谱-串联质谱联用仪：电喷雾离子源，质量范围5～2000 m/z，多反应监测模式定量，用于内源激素与药剂残留分析
3. 高效液相色谱仪：四元泵流量0.001～10 mL/min，配紫外与荧光检测器，柱温箱室温至80℃，用于氨基酸衍生分离与叶绿素定量
4. 数字PCR系统：微滴生成与信号读出一体，检测动态范围1～100000拷贝，用于低丰度转化体成分定量
5. 紫外-可见分光光度计：波长范围190～1100 nm，光谱带宽不大于2 nm，配微量比色皿，用于叶绿素与可溶性糖快速测定
6. 人工气候箱：温度范围4～50℃，湿度30%～95%RH，光照0～30000 lx，用于接种后保温保湿与发病诱导培养
7. 微量注射进样器：容量1～1000 μL，精度±1%，配定位支架，用于穗部注射接种与茎段定量注射
8. 生物安全柜：洁净度ISO 5级，下沉风速0.25～0.5 m/s，用于孢子悬液与菌液无菌制备
9. 高压蒸汽灭菌器：工作温度105～138℃，压力0～0.25 MPa，用于培养基与器械灭菌
10. 高速冷冻离心机：最高转速不低于20000 r/min，温控-20～40℃，用于核酸、蛋白与激素提取