检测项目
CD45总表达量测定:采用荧光强度定量分析(MFI≥10^3)
CD45RA/RO亚型分型:阈值设定为阳性细胞占比≥20%
CD45跨膜结构域完整性检测:WesternBlot法验证(分子量180-220kDa)
磷酸化CD45(Tyr394)活性测定:ELISA法(灵敏度0.1ng/mL)
CD45与其他标记物共表达分析:多色流式组合(≥8色方案)
检测范围
外周血单核细胞分离样本(密度梯度离心法获取)
骨髓穿刺液石蜡包埋切片(厚度4-5μm)
淋巴组织冰冻切片(保存温度-80℃)
培养细胞系悬浮液(活细胞率≥95%)
体液脱落细胞离心沉淀物(离心力300g)
检测方法
流式细胞术:ISO15189:2022医学实验室标准
免疫组织化学:GB/T37864-2019生物样本预处理规范
蛋白质印迹法:ASTME3106-18抗体特异性验证指南
酶联免疫吸附试验:GB/T40367-2021体外诊断试剂盒技术要求
荧光显微成像:ISO19001:2018光学系统校准规程
检测设备
BeckmanCoulterCytoFLEXLX流式细胞仪(13激光配置)
LeicaBOND-III全自动免疫组化染色系统
ThermoFisherMultiskanSkyHigh酶标仪(波长范围340-850nm)
AgilentBioTekCytation5细胞成像多功能仪
SiemensImmulite2000XPi化学发光分析仪
Eppendorf5430R高速冷冻离心机(最大转速30,000rpm)
RocheVentanaBenchmarkUltra染色平台
BDFACSAriaIII分选型流式细胞仪(4-2-2喷嘴配置)
OlympusBX53荧光显微镜(DP80双摄像头系统)
SartoriusQuintix224-1CN分析天平(精度0.1mg)