检测项目

1.基因组结构分析：采用全基因组测序技术检测ORF1ab、S蛋白编码区等关键基因序列完整性（引物组：CoV-ORF1ab-F/R）

2.衣壳蛋白抗原检测：通过ELISA法测定核衣壳蛋白（N蛋白）浓度阈值≥0.15IU/mL

3.病毒载量定量：实时荧光定量PCR测定Ct值≤38（探针序列：FAM-CCGTCTGCGGTATGTGGAA-BHQ1）

4.中和抗体效价测定：空斑减少中和试验（PRNT）评估血清抗体效价≥1:64

5.宿主细胞病变效应：VeroE6细胞培养观察CPE特征性改变（72小时培养周期）

检测范围

1.动物源性样本：猪肠道内容物/血清（PEDV）、犬粪便（CCoV）等

2.临床诊断样本：人类呼吸道拭子/肺泡灌洗液（SARS-CoV-2）

3.生物制品：疫苗原液/细胞基质中残留病毒验证

4.环境监测样本：污水/空气气溶胶富集液

5.食品接触材料：冷链运输包装表面拭子样本

检测方法

ISO15216-1:2017食品链病毒核酸检测通用规范

GB/T37871-2019RNA病毒核酸检测试剂盒质量评价要求

ASTME2888-19病毒灭活效果评估标准方法

GB19489-2008实验室生物安全通用要求

WHOEPI_MLS_2021.1病毒分离培养技术指南

检测设备

ThermoFisherQuantStudio5：实时荧光定量PCR系统（检测灵敏度达5copies/μL）

IlluminaNovaSeq6000：高通量测序平台（单次运行通量6Tb）

BeckmanCoulterCytoFLEXS：流式细胞仪（可检测0.1μm病毒颗粒）

SartoriusBIOSTATSTR：50L生物反应器（用于病毒扩增培养）

PerkinElmerEnVision：多功能酶标仪（支持TR-FRET超敏检测）

ZeissAxioObserver7：全自动倒置荧光显微镜（配备ApoTome光学切片模块）

MiltenyiBiotecCliniMACSProdigy：全封闭细胞处理系统（符合GMP规范）

Agilent4200TapeStation：核酸完整性分析仪（RIN值测定精度0.3）