检测项目
1.乙酰化修饰水平:检测Lysine残基的乙酰化位点及丰度(K9/K14/K18等)
2.磷酸化修饰分析:测定Serine/Threonine/Tyrosine磷酸化位点分布(pS/pT/pY)
3.甲基化定量:识别精氨酸/赖氨酸甲基化程度(Rme1/Rme2s/Rme2a/Kme1/Kme2/Kme3)
4.泛素化状态:测定Ubiquitin结合位点及多聚泛素链类型(K48/K63链特异性)
5.氧化损伤指标:定量羰基化及硝基化修饰水平(3-NT/HNE-Michael加成物)
检测范围
1.生物样本:血清/血浆/脑脊液等体液样本(体积≥200μL)
2.组织标本:冷冻/石蜡包埋组织切片(厚度5-10μm)
3.细胞培养物:贴壁/悬浮细胞裂解液(浓度≥1mg/mL)
4.重组蛋白药物:单抗/融合蛋白制剂(纯度≥95%)
5.体外诊断试剂:校准品/质控品/反应体系组分
检测方法
1.质谱分析法:ISO18414:2015蛋白质翻译后修饰定量标准
2.WesternBlot:GB/T39126-2020蛋白质磷酸化检测规范
3.ELISA定量:ASTME3060-2016酶联免疫吸附测定通则
4.毛细管电泳:GB/T34814-2017蛋白质电荷变异体分析标准
5.圆二色光谱:ISO20938:2018蛋白质二级结构测定规程
检测设备
1.ThermoFisherQExactiveHF-X质谱仪:高分辨Orbitrap技术实现pmol级修饰位点鉴定
2.Agilent1260InfinityII高效液相色谱系统:配备DAD检测器进行肽段分离纯化
3.Bio-RadChemiDocMP成像系统:化学发光法WesternBlot定量分析
4.PerkinElmerEnVision多模式酶标仪:支持TR-FRET/AlphaLISA多重检测技术
5.BeckmanPA800Plus毛细管电泳仪:执行cIEF及SDS-CE纯度分析
6.MalvernPanalyticalZetasizerNanoZSP:动态光散射测定蛋白质聚集状态
7.JascoJ-1500圆二色光谱仪:190-260nm波长扫描分析二级结构变化
8.GEHealthcareAKTApure25层析系统:执行分子排阻色谱稳定性测试