检测项目

1.总核苷酸含量测定：采用紫外分光光度法（λ=260nm），定量范围0.1-100μg/mL

2.单体纯度分析：HPLC法（C18色谱柱），纯度标准≥98%（面积归一化法）

3.三磷酸基团完整性：31PNMR检测（δ=-5至-22ppm），降解产物≤2%

4.内毒素限量：鲎试剂动态浊度法（LAL），符合USP<85>标准（≤0.25EU/mg）

5.金属离子残留：ICP-MS法（Li/Na/K/Ca/Mg/Fe），单项≤10ppm

检测范围

1.mRNA疫苗原料：包括N1-Me-pseudouridine等修饰核苷酸三磷酸

2.食品添加剂：酵母提取物中RNA水解产物（5'-核苷酸）

3.诊断试剂盒组分：荧光标记dUTP/dCTP等探针合成原料

4.细胞培养基：无血清培养基中核苷酸补充剂

5.法医样本：唾液/血液中游离核苷酸代谢物

检测方法

1.HPLC-UV联用法：GB/T37849-2019《核酸类物质纯度测定》

2.毛细管电泳法：ISO2066:2018《生物制品中核苷酸分离规程》

3.MALDI-TOF质谱：ASTME2728-19《核酸分子量测定标准指南》

4.离子对色谱法：GB/T39540-2020《修饰核苷酸定性定量分析》

5.酶联荧光法：ISO21572:2019《食品中基因修饰成分检测》

检测设备

1.Agilent1260InfinityIIHPLC系统：配备DAD检测器（190-640nm），用于纯度分析

2.ThermoScientificQExactiveHF-X质谱仪：高分辨ESI源（分辨率240,000），结构确证

3.BeckmanPA800Plus毛细管电泳仪：激光诱导荧光检测（LIF），灵敏度达0.1pg/μL

4.PerkinElmerNexION2000ICP-MS：动态反应池技术（DRC），检出限0.01ppb

5.MalvernZetasizerNanoZSP：动态光散射（DLS），粒径分布分析（0.3nm-10μm）

6.WatersACQUITYUPLCH-Class系统：BEHC18色谱柱（1.7μm），梯度洗脱分离

7.BrukerAvanceIIIHD600MHzNMR：QCI低温探头（1H/13C/31P多核检测）

8.EppendorfBioSpectrometerbasic：微量比色皿（0.5μL），A260/A280比值测定

9.Bio-RadChemiDocMP成像系统：SYBRGold染色凝胶分析（灵敏度达0.1ng）

10.ShimadzuUV-2600i分光光度计：积分球附件（固体样品反射率测定）