可送检的样品类型与对应检测项目

样品类型 典型应用场景 主要检测项目 常用方法 / 参考
人源肿瘤细胞系 HeLa、HepG2、A549、MCF-7、K562等传代培养、冻存复苏与实验室间转移 细胞系身份鉴定、误鉴与交叉污染排查、STR分型图谱建档 16-24个STR基因座复合扩增+毛细管电泳分型，参照ANSI/ATCC ASN-0002
人源胚肾与永生化细胞系 HEK293、293T、HaCaT等稳转株建库与放行检验 主细胞库与工作细胞库身份一致性、性别基因座核对 STR图谱比对，等位基因匹配率≥80%判为同源，辅以Amelogenin核对
动物源生产细胞系 CHO-K1、CHO-S、BHK21、Vero等重组蛋白与疫苗表达体系 种属鉴别、人源与鼠源交叉污染排查、细胞库代次一致性 种属特异性STR复合扩增与人源图谱联合判定，参照ICH Q5D框架
干细胞与原代培养物 骨髓与脐带来源MSC、iPSC及其分化产物的批次放行 身份溯源、批次间一致性、供体来源核对 STR基因座分型与已知供体参照图谱逐一比对
生物制品细胞基质 主细胞库、工作细胞库、生产终末期细胞的鉴定与稳定性监测 细胞基质身份鉴定、代次漂移评估 药典三部细胞基质检定相关通则要求下的STR指纹图谱
司法与法医生物检材 血斑、口腔拭子、组织切片等DNA检材的个体识别 个体识别与亲权关系分析的STR分型 复合STR扩增体系，参照SF/Z JD0105001-2016技术规范

检测项目

1. STR复合扩增分型：单次扩增16-24个基因座，目标等位基因片段范围约80-350bp

2. 图谱一致性判定：两份图谱等位基因匹配率≥80%判为同一来源，56%-79%属可疑区间需复核

3. 性别基因座核对：Amelogenin同源序列同步扩增，确认X或Y来源与细胞谱系记载相符

4. 种属间污染排查：人源与鼠源特异性基因座联合扩增，识别低比例种属交叉污染

5. 扩增均衡性控制：杂合基因座两等位基因峰高比通常≥0.6，stutter峰比例≤15%予以过滤

6. 检测灵敏度：模板DNA 0.5-1ng可获得完整图谱，0.05-0.1ng仍可检出部分等位基因

检测范围

1. 人源肿瘤细胞系：HeLa、HepG2、A549、MCF-7、K562、Jurkat等

2. 人源胚肾与永生化细胞系：HEK293、293T、HaCaT、IMR90等

3. 动物源细胞系：CHO-K1、CHO-S、BHK21、Vero、SP2/0等

4. 干细胞制剂：骨髓与脐带来源MSC、iPSC及其分化产物

5. 生物制品细胞库：主细胞库、工作细胞库、限定代次内生产细胞

6. 司法生物检材：血斑、口腔拭子、组织切片等DNA检材

检测方法

1. ANSI/ATCC ASN-0002-2011 人源细胞系鉴定用短串联重复序列图谱法标准

2. ICH Q5D 生物技术产品的细胞基质衍生与鉴定指导原则

3. 《中华人民共和国药典》2020年版三部 生物制品生产用细胞基质检定相关通则

4. SF/Z JD0105001-2016 亲权鉴定技术规范，STR体系分型与似然率评估

5. ISBER《生物样本库最佳实践》（第四版） 细胞系入库与放行的STR鉴定要求

检测设备

1. 毛细管电泳遗传分析仪：8道毛细管阵列，片段分型分辨率达1bp

2. 梯度PCR扩增仪：96孔模块，温度控制精度±0.2℃，升降温速率≥6℃/s

3. 荧光定量PCR仪：5荧光通道，用于模板DNA定量与扩增体系质控

4. 微量紫外分光光度计：dsDNA检测范围2-15000ng/μL

5. 荧光核酸定量仪：检测下限达pg级，适配低浓度模板精确定量

6. 二级生物安全柜：A2型，下降风速0.36-0.54m/s，满足细胞无菌操作要求

7. 恒温金属浴：温度范围室温-100℃，用于95℃双链变性孵育

8. 高速台式离心机：最高转速15000rpm，最大相对离心力21000×g

9. 凝胶成像系统：配合琼脂糖电泳进行扩增产物完整性预检

10. 超低温储存箱：-86℃深低温保存DNA模板与细胞冻存管